RPM a RCF jsou dvě jednotky, které lze použít k popisu rychlosti odstředivky. I když mohou vypadat podobně, jsou tak odlišní a jejich zmatení vyústilo v katastrofální konec mnoha experimentů.
Pojďme to tedy uvést černobíle, abychom nepodlehli na stejné chyby jako ti, kteří prošli laboratořemi světa před vámi.
Jak fungují centrifugy
Centrifugy fungují uvedení vzorků do rotace kolem pevné osy, čímž se aplikuje akcelerační síla kolmá k ose, jak je znázorněno na obrázku vpravo.
A tato síla samozřejmě způsobí, že částice ve vašem vzorku zrychlí směrem k vnější hrana rotoru. Výrobci odstředivek vhodně navrhují své odstředivky tak, aby dno zkumavek se vzorky bylo na vnějším okraji rotoru, takže odstředivá síla má za následek sedimentaci částic ve vašem vzorku na dno zkumavky.
Velikost síly potřebná k pohybu částice závisí na velikosti částice. Velké částice (např. Buňky) vyžadují menší sílu než malé částice (např. Vysrážené proteiny). Podrobnější informace najdete v těchto článcích Wikipedie o sedimentaci a Lammově rovnici.
Popis síly
Relativní odstředivá síla (RCF) je termín používaný k popisu množství akcelerační síly působící na vzorek v odstředivce. RCF se měří v násobcích standardního zrychlení v důsledku gravitace na zemském povrchu (x g). Proto se RCF a „xg“ používají v centrifugačních protokolech zaměnitelně.
Dvě proměnné, které popisují RCF, jsou poloměr a úhlová rychlost rotoru, tj. Jak široký je rotor a jak rychlý je pohybující se.
Pokud se rychlost otáčení udává v otáčkách za minutu (RPM) a poloměr je vyjádřen v centimetrech (cm), pak:
RCF nebo RPM?
Z toho je zřejmé, že správnou jednotkou pro množství odstřeďování použitou v daném protokolu je RCF (aka xg).
Ale většina odstředivek, zejména mikrocentrifug, má pouze nastavení pro RPM. Pokud tedy nemáte to štěstí, že máte centrifugu s nastavením RCF, budete muset vypracovat odpovídající RPM, které budou pro vaši centrifugu zapotřebí k dosažení RCF stanoveného v protokolu.
Toho lze snadno dosáhnout pomocí pravítka, změřením poloměru rotoru odstředivky a připojením čísel k online převaděči, jako je tento. od DJB Labcare. Alternativně má stejný web také velmi užitečný nonograf, který si můžete vytisknout a ponechat na stole, abyste jej mohli použít pro převody z rcf na rpm.
Zpráva Vezměte si domov je, že rychlosti centrifugace uvedené v RPM budou pouze být konstantní pro odstředivky se stejnými poloměry rotoru. Pokud použijete nastavení otáček z protokolu, kde někdo použil odstředivku s jiným poloměrem než vy, získáte jiný RCF. Rozdíl často nebude dostatečně významný, aby ovlivnil vzorek nebo centrifugu, ale někdy, např. pokud použijete nastavení RPM, které bylo původně určeno pro mikroodstředění v ultracentrifuze, může to způsobit problémy.
Častější chybou je předpokládat, že RCF = RPM, které může vést k laboratorním katastrofám, jako jsou tyto!