RPM och RCF är två enheter som kan användas för att beskriva centrifugens hastighet. Även om de kan se lika ut, är de så annorlunda och förvirrande har resulterat i ett katastrofalt slut på många experiment.
Så låt oss sätta det i svart och vitt för att se till att du inte ger efter till samma misstag som de som har passerat världens laboratorier före dig.
Hur centrifuger fungerar
Centrifuger fungerar efter sätta dina prover i rotation runt en fast axel och därigenom applicera en accelerationskraft vinkelrätt mot axeln som visas i diagrammet till höger.
Och naturligtvis får denna kraft partiklar i ditt prov att accelerera mot rotorns yttre kant. Det är bekvämt att centrifugtillverkare utformar sina centrifuger så att provrörens botten ligger vid rotorns ytterkant så att centrifugalkraften resulterar i sedimentering av partiklar i provet till botten av röret.
Mängden kraft som krävs för att flytta en partikel beror på partikelns storlek. Stora partiklar (t.ex. celler) kräver mindre kraft än små partiklar (t.ex. utfällda proteiner). För mer detaljerad information om detta, ta en titt på dessa Wikipedia-artiklar om sedimentering och Lamm-ekvationen.
Beskriv The Force
Relativ centrifugalkraft (RCF) är termen som används för att beskriva mängden accelerationskraft som appliceras på ett prov i en centrifug. RCF mäts i multiplar av standardacceleration på grund av gravitationen vid jordytan (x g). Det är därför RCF och ”xg” används omväxlande i centrifugeringsprotokoll.
De två variablerna som beskriver RCF är rotorns radie och vinkelhastighet, dvs. hur bred rotorn är och hur snabb den är rör sig.
Om rotationshastigheten ges i varv per minut (RPM) och radien uttrycks i centimeter (cm), då:
RCF eller RPM?
Av detta är det uppenbart att rätt enhet för mängden centrifugering som ska användas i ett visst protokoll är RCF (aka xg).
Men de flesta centrifuger, särskilt mikrocentrifuger, har bara inställningar för RPM. Så om du inte har turen att ha en centrifug med en RCF-inställning, måste du räkna ut motsvarande RPM som krävs för DIN centrifug för att uppnå RCF som anges i ett protokoll.
Detta kan enkelt göras genom att ta din linjal, mäta radien på din centrifugrotor och ansluta siffrorna till en online-omvandlare som den här från DJB Labcare. Alternativt har samma webbplats också en mycket användbar nonograf som du kan skriva ut och ha på din bänk för att använda för rcf till rpm-omvandlingar.
Medtagandet hemtagande är att centrifugeringshastigheter i citerade i RPM bara kommer att vara konstant för centrifuger med samma rotorradier. Om du använder en RPM-inställning från ett protokoll där någon använde en centrifug med en annan radie än din, får du en annan RCF. Ofta kommer skillnaden inte att vara tillräckligt stor för att påverka provet eller centrifugen, men ibland, t.ex. om du använder en RPM-inställning som ursprungligen var avsedd för en mikroflukt i en ultracentrifug kan det orsaka problem.
Ett vanligare misstag är att anta att RCF = RPM som kan leda till labkatastrofer, som dessa!
