RPM en RCF zijn twee eenheden die kunnen worden gebruikt om de snelheid van een centrifuge te beschrijven. Hoewel ze er misschien hetzelfde uitzien, zijn ze o zo verschillend en door ze te verwarren is er een rampzalig einde gekomen aan menig experiment.

Laten we het dus in zwart-wit zetten om ervoor te zorgen dat je niet bezwijkt op dezelfde fouten als degenen die vóór u door de laboratoria van de wereld zijn gegaan.

Hoe centrifuges werken

Centrifuges werken door uw monsters in rotatie brengen rond een vaste as, daarbij een versnellende kracht loodrecht op de as uitoefenen, zoals weergegeven in het diagram rechts.

En natuurlijk zorgt deze kracht ervoor dat deeltjes in uw monster versnellen naar de buitenrand van de rotor. Het is handig dat fabrikanten van centrifuges hun centrifuges zo ontwerpen dat de bodem van de monsterbuisjes zich aan de buitenrand van de rotor bevindt, zodat de middelpuntvliedende kracht resulteert in sedimentatie van deeltjes in uw monster naar de bodem van de buis.

De hoeveelheid kracht die nodig is om een deeltje te verplaatsen, is afhankelijk van de grootte van het deeltje. Grote deeltjes (bijv. Cellen) hebben minder kracht nodig dan kleine deeltjes (bijv. Neergeslagen eiwitten). Voor meer gedetailleerde informatie hierover, bekijk deze Wikipedia-artikelen over sedimentatie en de Lamm-vergelijking.

De kracht beschrijven

Relatieve middelpuntvliedende kracht (RCF) is de term die wordt gebruikt om te beschrijven de hoeveelheid versnellende kracht die in een centrifuge op een monster wordt uitgeoefend. RCF wordt gemeten in veelvouden van de standaardversnelling als gevolg van de zwaartekracht aan het aardoppervlak (x g). Dit is de reden waarom RCF en “xg” door elkaar worden gebruikt in centrifugatieprotocollen.

De twee variabelen die RCF beschrijven zijn de straal en de hoeksnelheid van de rotor. Dwz hoe breed de rotor is en hoe snel hij is. bewegend.

Als de rotatiesnelheid wordt gegeven in omwentelingen per minuut (RPM) en de straal wordt uitgedrukt in centimeters (cm), dan:

RCF of RPM?

Hieruit blijkt duidelijk dat de juiste eenheid voor de hoeveelheid centrifugatie die in een bepaald protocol moet worden gebruikt, RCF is (ook bekend als xg).

Maar de meeste centrifuges, vooral microcentrifuges, hebben alleen instellingen voor RPM. Dus tenzij je het geluk hebt een centrifuge te hebben met een RCF-instelling, zul je het overeenkomstige toerental moeten berekenen dat nodig is voor JOUW centrifuge om de RCF te bereiken die in een protocol is vastgelegd.

Dit kan eenvoudig worden gedaan door uw liniaal te nemen, de straal van uw centrifugerotor te meten en de cijfers in een online converter zoals deze te steken van DJB Labcare. Als alternatief heeft dezelfde site ook een zeer nuttige nonograaf die u kunt afdrukken en op uw bank kunt bewaren om te gebruiken voor conversies van rcf naar rpm.

De boodschap die thuiskomt is dat de centrifugeersnelheden in RPM alleen constant zijn voor centrifuges met dezelfde rotorradii. Als je een RPM-instelling gebruikt van een protocol waarbij iemand een centrifuge gebruikte met een andere straal dan de jouwe, krijg je een andere RCF. Vaak is het verschil niet significant genoeg om het monster of de centrifuge te beïnvloeden, maar soms b.v. als je een RPM-instelling gebruikt die oorspronkelijk bedoeld was voor een microfuge in een ultracentrifuge, kan dit problemen veroorzaken.

Een meer algemene fout is te veronderstellen dat RCF = RPM, wat kan leiden tot labrampen, zoals deze!