Lady Macbeth er en av Shakespeares mest berømte og skremmende kvinnelige tegn. Når vi først ser henne, planlegger hun allerede Duncans drap, og hun er sterkere, mer hensynsløs og mer ambisiøs enn mannen hennes. Hun virker fullstendig klar over dette og vet at hun må presse Macbeth til å begå drap. På et tidspunkt ønsket hun at hun ikke var kvinne slik at hun kunne gjøre det selv. Temaet om forholdet mellom kjønn og makt er nøkkelen til LadyMacbeths karakter: mannen hennes antyder at hun er en maskulin som bor i en kvinnelig kropp, som ser ut til å knytte maskulinitet til ambisjon og vold. Shakespeare ser imidlertid ut til å bruke henne, og heksene, for å undergrave Macbeths ide om at «uforsvarlig mettle skal komponere / ingenting annet enn hanner» (1.7.73–74). Disse listige kvinnene bruker kvinnelige metoder for å oppnå kraft – det vil si manipulering – for å videreføre deres antatte mannlige ambisjoner. Kvinner, antyder stykket, kan være like ambisiøse og grusomme som menn, men sosiale begrensninger nekter dem middel til å forfølge disse ambisjonene sine egne.

Lady Macbeth manipulerer mannen sin med bemerkelsesverdig effektivitet, overordnet når han nøler med å myrde, stiller han gjentatte spørsmål ved sin manndom til han føler at han må begå drap for å bevise seg. Lady Macbeths bemerkelsesverdige styrke av viljemenn ved mordet på kongen – det er hun som støtter mannen sin nerver umiddelbart etter at forbrytelsen har Etterpå begynner hun imidlertid en langsom glide inn i galskap – akkurat som ambisjon påvirker henne sterkere enn Macbeth før forbrytelsen, så plager skyld henne sterkere etterpå. Ved slutten av stykket har hun blitt redusert til å gå gjennom slottet og prøver desperat å vaske bort en usynlig blodflekk. Når skyldfølelsen kommer hjem for å bli hjemme, blir Lady Macbeths følsomhet en svakhet, og hun klarer ikke å takle det. Det er viktig at hun (tilsynelatende) dreper seg selv og signaliserer hennes totale manglende evne til å takle arven fra forbrytelsene deres.