Lady Macbeth je jednou z Shakespearových nejslavnějších a nejděsivějších ženských postav. Když ji poprvé uvidíme, už plánuje Duncanova smrt, a je silnější, bezohlednější a ambicióznější než její manžel. Zdá se, že si toho je plně vědoma a ví, že bude muset tlačit na Macbetha, aby spáchal vraždu. V jednu chvíli si přeje, aby nebyla ženou, aby to dokázala sama. Téma vztahu mezi pohlavím a mocí je klíčem k charakteru LadyMacbeth: její manžel naznačuje, že je mužská duše obývající ženské tělo, což, jak se zdá, spojuje mužskost s ambicí a násilím. Zdá se však, že Shakespeare ji a čarodějnice používá k podkopání Macbethovy myšlenky, že „neohrožená vůle by měla obsahovat / nic než muže“ (1.7.73–74). Tyto vychytralé ženy používají ženské metody k dosažení moci – tj. Manipulace – k dalšímu jejich údajné mužské ctižádosti. Ženy, jak hra naznačuje, mohou být stejně ambiciózní a kruté jako muži, ale sociální omezení jim upírají prostředky k uskutečnění těchto vlastních ambicí.

Lady Macbeth manipuluje svého manžela s pozoruhodnou účinností, převažující všechny jeho námitky; když váhá s vraždou, opakovaně zpochybňuje jeho mužství, dokud necítí, že se musí zavraždit, aby se prokázal. Pozoruhodná síla vůlí lady Macbethové díky vraždě krále – je to ona, kdo bezprostředně po zločinu udrží manželovy nervy Poté však začne pomalu vklouznout do šílenství – stejně jako na ni anambition působí silněji než Macbeth před tímto zločinem, tak ji poté silněji postihne vina. Na konci hry byla přeměněna na náměsíčnost přes hrad a zoufale se snažila smýt neviditelnou krvavou skvrnu. Jakmile se pocit viny vrátí domů, citlivost Lady Macbeth se stane slabostí a nedokáže to zvládnout. Je příznačné, že se (zjevně) zabije, což signalizuje její naprostou neschopnost vypořádat se s odkazem jejich zločinů.