54. regiment, i sin helhet Femtifjerte Massachusetts Frivillig infanteriregiment, Massachusetts infanterienhet bestående av afroamerikanere som var aktiv under den amerikanske sivile Krig (1861–65). Det 54. regimentet ble kjent for sin kampdyktighet og for det store motet fra medlemmene. Driftene ble avbildet i 1989-filmen Glory.
Den avskaffende guvernøren i Massachusetts, John Andrew, samlet det 54. regimentet tidlig på 1863 etter å ha fått autorisasjon til gjør det fra USAs krigssekretær Edwin Stanton. Selv om alle regimentets offiserer var hvite – et faktum som opprørte mange nordlige ledere på den tiden – overtalte Andrews frittalende talsmann mange fremtredende afroamerikanere til å støtte ideen. Blant de som aktivt rekrutterte til enheten, var Frederick Douglass, Martin Delany, Henry Highland Garnet og John Mercer Langston. De og andre ledere mente at hvis det 54. regiment kunne lykkes i kamp, ville anklager om rasemessig underlegenhet, så ofte på den tiden, bli undergravd avgjørende. På grunn av den omfattende rekrutteringsinnsatsen trakk det 54. regimentet, i motsetning til andre borgerkrigsenheter, rekkene sine fra hele det nordlige USA og utover, inkludert noen konfødererte stater, Canada og Vestindia.
Ledet av Oberst Robert Gould Shaw, medlem av en fremtredende avskaffelsesfamilie i Boston, markerte det 54. regimentet seg snart i kamp. Den første suksessen kom 16. juli 1863 på Sea Islands utenfor South Carolina, hvor enheten avviste et konføderert angrep på James Island. Bare to dager senere kom en mer avgjørende test. I et angrep på Fort Wagner, på Morris Island i Charleston, South Carolina, kjempet det 54. regimentet tappert mot en sterkere konføderert styrke. Mer enn halvparten av regimentet gikk tapt i den kampen. For hans mod i Fort Wagner, Sgt. William H. Carney ble den første afroamerikaneren som tjente Medal of Honor, landets høyeste militære pris.
Fremførelsen til det 54. regimentet i Fort Wagner overbeviste mange nordlige ledere om at afroamerikanere kunne være gode soldater, som banet vei for ytterligere verving av afroamerikanere i krigsinnsatsen. Mot slutten av borgerkrigen hadde over 178 000 afroamerikanere tjent i unionshæren, og spilte en avgjørende rolle i den nordlige seieren. Eksperimentet med å tillate afroamerikanere i militæret hadde vært en stor suksess.
Dessverre var ikke slagmarkens vanskeligheter de eneste vanskelighetene som det 54. regimentet måtte tåle. Den føderale regjeringen fornektet sin opprinnelige garanti for at den ville betale svarte soldater det samme som hvite soldater. Som svar førte regimentet andre afroamerikanske enheter til å nekte å ta imot penger fra den føderale regjeringen i nesten ett år. Under trusselen om mytteri fra afroamerikanske enheter og møtt med økende press fra antislaveriske kongressmedlemmer og en stor brevskrivingskampanje som ble utført av soldatene og deres støttespillere, ga den føderale regjeringen endelig lik lønn i juni 1864. Regimentet ble mønstret ut av hær etter krigen, i august 1865.