女性の健康問題における最も重要な問題の1つエストロゲン補充療法のリスクと利点。エストロゲン補充療法に関する継続的な不確実性とコンセンサスの欠如により、多くの女性は、ハーブ療法を含むエストロゲンの代替供給源を探すようになりました。ハーブのエストロゲン生物活性を測定するために、組換え細胞バイオアッセイを採用しました。アカツメクサ、ドンクアイ、ブラックコホシュ、大豆、ツルドクダミ、セイヨウニンジンボク、フォティ、ホップのエストロゲン生物活性をinvitroで調べました。大豆、クローバー、甘草、ホップは、他の方法を使用した以前の報告に基づいて、疑われるように、大量の測定可能なエストロゲン生物活性を持っています。以前に報告されていないfo-tiの抽出物で驚くほど高いエストロゲン活性を発見しました。チェストツリーベリー、ブラックコホシュ、ドンクアイは、この方法では測定可能な活性がありませんでした。また、大豆からアグリコン基を除去すると、そのエストロゲンの生物活性が大幅に増加することも発見しました。エストラジオールのこの組換え細胞バイオアッセイは、ハーブ製品の生物活性を測定するために使用できると結論付けています。研究されたfo-tiの調製物は、ハーブ1マイクログラムあたり409±55 pmol /リットルのエストラジオール当量のエストロゲン活性を示しました。これは17β-エストラジオールの1/300の活性です。これらのハーブを含む栄養補助食品を使用して女性のエストロゲン生物活性を決定するための臨床研究が進行中です。

女性の健康における最も重要な問題の1つは、エストロゲン補充療法のリスクと利点に関するものです。 。しかし、継続的な不確実性と標準的なエストロゲン補充療法のコンセンサスの欠如により、多くの女性がハーブ療法を含む代替のエストロゲン源を探すようになりました（1）。利用可能な準備で使用されるいくつかのハーブがありますが、最も一般的なものには、レッドクローバー、ドンクアイ、コホッシュ、大豆、甘草、および貞淑なツリーベリーが含まれます。エストロゲン様効果のために使用されたハーブのかなりの歴史にもかかわらず、これらのハーブのいくつかでエストロゲン活性の測定の報告があったのはごく最近のことです（2–9）。さらに、女性におけるこれらの製剤の効果に関する多くの対照研究はありませんでした。これらのサプリメントの使用、投与、または長期的な安全性に関するコンセンサスは残っていません。

以前、非常に低レベルのエストラジオールを評価するためのエストラジオールの組換え細胞バイオアッセイの使用を実証しました子供と閉経後の女性の血清中（10–16）。このアッセイは、エストロゲン応答エレメントをコードするプラスミドとERαをコードするプラスミドで形質転換された酵母系におけるエストロゲン受容体（ER）αの結合を介してエストロゲン活性を測定します（17）。この方法論の適応を使用して、次のハーブのエストロゲンの生物活性を評価しようとしました：レッドクローバー（Trifolium pretenseL。）、ドンクアイ（Angelica sinensis）、ブラックコホシュ（Cimicifuga racemosa）、大豆、甘草（Glycyrrhiza glabra） ）、チェストツリーベリー（Vitex agnus-castus L。）、fo-ti（Polygonum multiflorum）、およびホップ（Humulus lupulus L。）。

材料と方法

ハーブ抽出

チェストツリーベリー、ブラックコホシュ、レッドクローバー、ドンクアイ、フォティ、甘草、ホップ、大豆、大豆アグリコン（SoyA）のエストロゲン活性を次のように分析しました。乾燥ハーブ抽出物は、栄養補助食品カプセルに配合する前に、Natural Alternative International（San Marcos、CA）から入手しました。 3 mgが使用された大豆とSoyAを除いて、各ハーブの60ミリグラムが抽出に使用されました。 2mlのエーテルで抽出された甘草を除いて、すべてのハーブは2mlのメタノールで抽出されました。ハーブと溶媒を2分間ボルテックスし、3000rpmで10分間遠心分離しました。上清を除去し、0.45μmガラスシリンジフィルターでろ過し、使用するために室温で保存しました。

エストロゲンアッセイ

エストラジオールのバイオアッセイについては、以前に詳細に説明しました（17）。エストロゲン活性は、遺伝子操作された酵母システムにおけるER結合によって定義されます。簡単に言えば、2つのプラスミドで形質転換されたSaccharomycescerevisiaeの菌株を使用します。 1つのプラスミドにはヒトER相補DNAが含まれ、もう1つのプラスミドにはβ-ガラクトシダーゼの構造遺伝子に融合した酵母イソ-1-シトクロムCプロモーターの上流にエストロゲン応答エレメントが含まれています。形質転換された酵母は、ハーブ抽出物の存在下で選択培地で増殖させます。 β-ガラクトシダーゼ活性はアッセイされ、既知量のエストラジオールをアッセイ培地に添加することによって作成された標準曲線から線形補間によってエストラジオール等価単位に変換されます。研究期間中のバイオアッセイの感度は0.02–2 pg / ml（0.07–7 pmol / L）でした。

統計

各ハーブ抽出物を3回分析し、3回の連続アッセイで繰り返しました。エストラジオール当量は、既知量の17β-エストラジオールを含むアッセイ培地で作成された標準曲線からの補間によって計算されました。 （図1）。したがって、結果は、乾燥ハーブ抽出物のマイクログラムあたり1リットルあたりのピコモルでのエストラジオール当量で表されます。すべてのデータは平均±sdとして表されます。グループ間の比較は、事後補正（最小の統計的差異）を伴う多変量ANOVAを使用して行われました。差は、P < 0.05で有意であると見なされました。

結果

測定可能なエストロゲン活動はレッドクローバー、フォティ、ホップ、大豆、甘草で示されましたが、セイヨウニンジンボク、ブラックコホシュ、ドンクアイでは見られませんでした（表1）。図2に示すように、エストロゲン活性が検出可能なハーブの中で、非グリコシル化大豆（SoyA）は、大豆を含む他のハーブと比較して、エストラジオール当量が最も多く含まれていることがわかりました。かなりのエストロゲン生物活性は、アカツメクサとツルドクダミでも確認されました。甘草とホップは、fo-tiよりもエストロゲン活性が有意に低かった。 fo-tiでのエストロゲン活性の検出はこれまで報告されていません。