riscurile și beneficiile terapiei de substituție estrogenică. Incertitudinea continuă și lipsa consensului cu privire la terapia de substituție a estrogenului au determinat multe femei să caute surse alternative de estrogen, inclusiv remedii pe bază de plante. Am adaptat un test biologic cu celule recombinante pentru a măsura bioactivitatea estrogenilor din plante. Am studiat, in vitro, bioactivitatea estrogenilor în trifoiul roșu, dong quai, cohosh negru, soia, lemn dulce, boabe de copaci casti, fo-ti și hamei. Soia, trifoiul, lemnul dulce și hameiul au o cantitate mare de bioactivitate estrogenică măsurabilă, după cum se suspectează, pe baza rapoartelor anterioare care utilizează alte metode. Am descoperit activitate estrogenă surprinzător de mare în extracte de fo-ti care nu au fost raportate anterior. Boabele de casti, cohoshul negru și dong quai nu au avut activitate măsurabilă cu această metodă. De asemenea, am descoperit că îndepărtarea unei grupări gliconice din soia crește semnificativ bioactivitatea estrogenului. Concluzionăm că acest test biologic cu celule recombinante pentru estradiol poate fi utilizat pentru a măsura bioactivitatea produselor pe bază de plante. Preparatele de fo-ti studiate au avut o activitate estrogenică de 409 ± 55 pmol / litru echivalenți de estradiol per microgram de plantă, ceea ce reprezintă 1 / 300th activitatea 17β-estradiol. Studiile clinice sunt în desfășurare pentru a determina bioactivitatea estrogenului la femeile care utilizează suplimente alimentare care conțin aceste ierburi.

UNUL dintre cele mai importante probleme în sănătatea femeilor se referă la riscurile și beneficiile terapiei de substituție cu estrogen. . Cu toate acestea, incertitudinea continuă și lipsa consensului terapiei standard de substituție a estrogenului au determinat multe femei să caute surse alternative de estrogen, inclusiv remedii pe bază de plante (1). Există mai multe plante folosite în preparatele disponibile, dintre care cele mai frecvente includ: trifoi roșu, dong quai, cohosh, soia, lemn dulce și boabe de copac casti. În ciuda istoricului considerabil de plante folosite pentru efectele lor asemănătoare estrogenilor, abia recent s-au raportat măsurători ale activității estrogenice în unele dintre aceste plante (2-9). În plus, nu au existat multe studii controlate ale efectului acestor preparate la femei. Nu există un consens în ceea ce privește utilizarea, dozarea sau siguranța pe termen lung a acestor suplimente.

Anterior, am demonstrat utilizarea unui test biologic cu celule recombinante pentru estradiol pentru a evalua nivelurile foarte scăzute de estradiol. în serul copiilor și femeilor aflate în postmenopauză (10-16). Această analiză măsoară activitatea estrogenului prin legarea receptorului de estrogen (ER) α într-un sistem de drojdie transformat cu un element de răspuns estrogen care codifică plasmida și o plasmidă care codifică ERα (17). Folosind o adaptare a acestei metodologii, am încercat să evaluăm bioactivitatea estrogenului în următoarele plante: trifoi roșu (Trifolium pretense L.), dong quai (Angelica sinensis), cohosh negru (Cimicifuga racemosa), soia, lemn dulce (Glycyrrhiza glabra ), boabe de copaci casti (Vitex agnus-castus L.), fo-ti (Polygonum multiflorum) și hamei (Humulus lupulus L.).

Materiale și metode

Extracția plantelor

Boabe de copaci casti, cohosh negru, trifoi roșu, dong quai, fo-ti, lemn dulce, hamei, soia și aglicon de soia (SoyA) au fost analizate pentru activitatea estrogenică după cum urmează. Extractele de plante uscate au fost obținute de la Natural Alternative International (San Marcos, CA) înainte de a se compune în capsule de supliment alimentar. Pentru extracție s-au folosit șaizeci de miligrame din fiecare plantă, cu excepția soiei și a soia, pentru care s-au folosit 3 mg. Toate ierburile au fost extrase cu 2 ml metanol, cu excepția lemnului dulce, care a fost extras cu 2 ml eter. Ierburile și solventul au fost agitate timp de 2 minute și centrifugate la 3000 rpm timp de 10 min. Supernatantul a fost îndepărtat și filtrat printr-un filtru de seringă de sticlă de 0,45 μm și depozitat la temperatura camerei pentru utilizare. Activitatea estrogenului este definită prin legarea ER într-un sistem de drojdie modificat genetic. Pe scurt, folosește o tulpină de Saccharomyces cerevisiae care este transformată cu două plasmide. O plasmidă conține ADN complementar uman ER, iar cealaltă conține un element de răspuns la estrogen în amonte de promotorul izo-1-citocrom C de drojdie fuzionat cu gena structurală pentru β-galactozidază. Drojdia transformată este cultivată în mediu selectiv în prezența extractului de plante. Activitatea β-galactozidazei este testată și convertită în unități echivalente cu estradiol prin interpolare liniară dintr-o curbă standard construită prin adăugarea unor cantități cunoscute de estradiol în mediul de testare. Sensibilitatea bioanalizei a fost de 0,02-2 pg / ml (0,07-7 pmol / litru) în timpul studiului.

Statistici

Fiecare extract din plante a fost analizat în triplicat și repetat pe parcursul a trei analize consecutive. Echivalenții estradiolului au fost calculați prin interpolare dintr-o curbă standard construită în medii de testare cu cantități cunoscute de 17β-estradiol. (Fig. 1). Prin urmare, rezultatele sunt exprimate în echivalenți de estradiol în picomoli pe litru per microgram de extract de plante uscate. Toate datele sunt exprimate ca medie ± sd. Comparațiile între grupuri au fost făcute utilizând un ANOVA multivariat cu corecție post hoc (cea mai mică diferență statistică). Diferențele au fost considerate semnificative la P < 0.05.