Yksi tärkeimmistä naisten terveysongelmista estrogeenikorvaushoidon riskit ja hyödyt. Jatkuva epävarmuus ja yksimielisyyden puute estrogeenikorvaushoidosta ovat saaneet monet naiset etsimään vaihtoehtoisia estrogeenilähteitä, mukaan lukien rohdosvalmisteet. Mukautimme rekombinanttisolujen biotestiä estrogeenin bioaktiivisuuden mittaamiseksi yrtteissä. Tutkimme in vitro estrogeenin bioaktiivisuutta punaisessa apilassa, dong quaissa, mustassa cohoshissa, soijalla, lakritsi, siveäpuumarja, fo-ti ja humala. Soijalla, apilalla, lakritsilla ja humalalla on epäiltynä suuri määrä mitattavissa olevaa estrogeenibioaktiivisuutta aikaisempien, muita menetelmiä käyttävien raporttien perusteella. Löysimme yllättävän korkean estrogeeniaktiivisuuden fo-ti-uutteista, joita ei ole aiemmin raportoitu. Suhteellisen puun marjalla, mustalla cohoshilla ja dong quaiilla ei ollut mitattavaa aktiivisuutta tällä menetelmällä. Huomasimme myös, että glykoniryhmän poistaminen soijasta lisää sen estrogeenin bioaktiivisuutta merkittävästi. Päätelmämme on, että tätä rekombinanttista solun biotestiä estradiolille voidaan käyttää mitattaessa kasviperäisten tuotteiden bioaktiivisuutta. Tutkittujen fo-ti-valmisteiden estrogeeniaktiivisuus oli 409 ± 55 pmol / l estradioliekvivalentteina yrtin mikrogrammaa kohti, mikä on 1/300 17p-estradiolin aktiivisuutta. Kliiniset tutkimukset ovat käynnissä estrogeenin bioaktiivisuuden määrittämiseksi naisilla, jotka käyttävät näitä yrttejä sisältäviä ravintolisiä.

YKSI naisten terveyden tärkeimmistä kysymyksistä koskee estrogeenikorvaushoidon riskejä ja hyötyjä . Jatkuva epävarmuus ja yksimielisyyden puute tavanomaisesta estrogeenikorvaushoidosta ovat kuitenkin saaneet monet naiset etsimään vaihtoehtoisia estrogeenilähteitä, mukaan lukien rohdosvalmisteet (1). Käytettävissä olevissa valmisteissa käytetään useita yrttejä, joista yleisimpiä ovat: punainen apila, dong quai, cohosh, soija, lakritsi ja kastanjapuumarja. Huolimatta huomattavasta historiasta yrtteistä, joita käytetään estrogeenin kaltaisissa vaikutuksissaan, vasta äskettäin on raportoitu estrogeenisen aktiivisuuden mittaamisesta joissakin näistä yrtteistä (2–9). Lisäksi näiden valmisteiden vaikutuksesta naisiin ei ole ollut paljon kontrolloituja tutkimuksia. Näiden lisäravinteiden käytöstä, annostuksesta tai pitkäaikaisesta turvallisuudesta ei ole yksimielisyyttä.

Aikaisemmin olemme osoittaneet rekombinantin solutestimäärityksen käytön estradiolille estradiolin erittäin alhaisen tason arvioimiseksi. lasten ja postmenopausaalisten naisten seerumissa (10–16). Tämä määritys mittaa estrogeeniaktiivisuutta sitoutumalla estrogeenireseptorin (ER) a hiivasysteemiin, joka on transformoitu estrogeenivasteen elementtejä koodaavalla plasmidilla ja ERa: ta koodaavalla plasmidilla (17). Tämän menetelmän mukauttamisen avulla olemme yrittäneet arvioida estrogeenin bioaktiivisuutta seuraavissa yrtteissä: punainen apila (Trifolium pretense L.), dong quai (Angelica sinensis), musta cohosh (Cimicifuga racemosa), soija, lakritsi (Glycyrrhiza glabra) ), siveäpuumarja (Vitex agnus-castus L.), fo-ti (Polygonum multiflorum) ja humala (Humulus lupulus L.).

Materiaalit ja menetelmät

Yrttiuutto

Chaste tree marja, musta cohosh, punainen apila, dong quai, fo-ti, lakritsi, humala, soija ja soijaglykoni (SoyA) analysoitiin estrogeeniaktiivisuuden suhteen seuraavasti. Kuivatut yrttiuutteet saatiin Natural Alternative Internationalilta (San Marcos, CA) ennen niiden yhdistämistä ravintolisäkapseleihin. Uuttamiseen käytettiin kuusikymmentä milligrammaa kutakin yrttiä, lukuun ottamatta soijaa ja soija-ainetta, joihin käytettiin 3 mg. Kaikki yrtit uutettiin 2 ml: lla metanolia paitsi lakritsi, joka uutettiin 2 ml: lla eetteriä. Yrttiä ja liuotinta sekoitettiin 2 minuutin ajan ja sentrifugoitiin nopeudella 3000 rpm 10 minuutin ajan. Supernatantti poistettiin ja suodatettiin 0,45 μm: n lasiruiskusuodattimen läpi ja varastoitiin huoneenlämmössä käyttöä varten. Estrogeeniaktiivisuus määritellään ER: n sitoutumisella geenitekniikkaan perustuvassa hiivasysteemissä. Lyhyesti sanottuna siinä käytetään Saccharomyces cerevisiae -kantaa, joka transformoidaan kahdella plasmidilla. Yksi plasmidi sisältää ihmisen ER-komplementaarisen DNA: n ja toinen sisältää estrogeenivaste-elementin ylävirtaan hiivan iso-1-sytokromi C-promoottorista fuusioituna P-galaktosidaasin rakennegeeniin. Transformoitua hiivaa kasvatetaan valikoivassa alustassa yrttiuutteen läsnä ollessa. P-galaktosidaasiaktiivisuus määritetään ja muunnetaan estradioliekvivalenttiyksiköiksi lineaarisella interpoloinnilla standardikäyrästä, joka on muodostettu lisäämällä tunnettuja määriä estradiolia määritysväliaineeseen. Biomäärityksen herkkyys oli 0,02–2 pg / ml (0,07–7 pmol / litra) tutkimuksen aikana.

Tilastot

Jokainen yrttiuute analysoitiin kolmena kappaleena ja toistettiin kolmena peräkkäisenä määrityksenä. Estradioliekvivalentit laskettiin interpoloimalla standardikäyrästä, joka oli rakennettu määritysväliaineeseen tunnettujen määrien 17p-estradiolin kanssa. (Kuva 1). Siksi tulokset ilmaistaan estradioliekvivalentteina pikomooleina / l / mikrogramma kuivaa yrttiuutetta. Kaikki tiedot ilmaistaan keskiarvona ± sd. Ryhmien väliset vertailut tehtiin käyttämällä monivaihtuvaa ANOVA: ta post hoc -korjauksella (pienin tilastollinen ero). Eroja pidettiin merkittävinä P < 0,05: ssä.

Tulokset

Mitattavissa oleva estrogeeni aktiivisuus osoitettiin punaisella apilalla, fo-ti: llä, humalalla, soijalla ja lakritsilla, kun taas mitään ei löytynyt puhtaasta puumarjasta, mustasta cohoshista tai dong quaiista (taulukko 1). Kuten kuvassa 2 on osoitettu, aglykosyloidun soijan (SoyA) havaittiin niiden yrttien joukossa, joilla oli havaittavaa estrogeeniaktiivisuutta, sisältävän suurimman määrän estradioliekvivalentteja verrattuna muihin, mukaan lukien soija. Huomattava estrogeenin bioaktiivisuus havaittiin myös punaisessa apilassa ja fo-ti: ssä. Lakritsi ja humala estrogeeniaktiivisuutta olivat merkittävästi alhaisemmat kuin fo-ti. Estrogeeniaktiivisuuden havaitsemista fo-ti: ssä ei ole aiemmin raportoitu.