Lady Macbeth es uno de los personajes femeninos más famosos y aterradores de Shakespeare. Cuando la vemos por primera vez, ya está tramando el asesinato de Duncan, y es más fuerte, más despiadada y más ambiciosa que su marido. Parece ser plenamente consciente de esto y sabe que tendrá que empujar a Macbeth a cometer un asesinato. En un momento, ella deseó no ser una mujer para poder hacerlo ella misma. Este tema de la relación entre género y poder es clave para el carácter de LadyMacbeth: su esposo implica que ella es un alma masculina que habita un cuerpo femenino, lo que parece vincular la masculinidad con la ambición y la violencia. Shakespeare, sin embargo, parece usarla a ella, y a las brujas, para socavar la idea de Macbeth de que «el temple intrépido debe componerse / nada más que hombres» (1.7.73-74). Estas astutas mujeres usan métodos femeninos para lograr el poder, es decir, la manipulación, Las mujeres, implica la obra, pueden ser tan ambiciosas y crueles como los hombres, pero las limitaciones sociales les niegan los medios para perseguir estas ambiciones por sí mismas.

Lady Macbeth manipula a su marido con una eficacia notable, todas sus objeciones; cuando él duda en asesinar, ella cuestiona repetidamente su hombría hasta que siente que debe cometer un asesinato para demostrar su valía. Después, sin embargo, comienza a deslizarse lentamente hacia la locura, así como la ambición la afecta más que a Macbeth antes del crimen, la culpa la atormenta con más fuerza después. Al final de la obra, se ha visto reducida a caminar sonámbula por el castillo, tratando desesperadamente de lavar una mancha de sangre invisible. Una vez que la sensación de culpa llega a casa para descansar, la sensibilidad de Lady Macbeth se convierte en una debilidad y es incapaz de afrontarlo. Significativamente, ella (aparentemente) se suicida, lo que indica su total incapacidad para lidiar con el legado de sus crímenes.