En av de viktigaste frågorna i kvinnors hälsoproblem riskerna och fördelarna med östrogenersättningsterapi. Kontinuerlig osäkerhet och brist på samförstånd om östrogenersättningsterapi har fått många kvinnor att söka alternativa källor till östrogen, inklusive naturläkemedel. Vi anpassade en rekombinant cellbioanalys för att mäta östrogenbioaktivitet i örter. Vi studerade, in vitro, östrogenbioaktivitet hos rödklöver, dong quai, svart cohosh, soja, lakrits, kysk trädbär, fo-ti och humle. Soja, klöver, lakrits och humle har en stor mängd mätbar östrogenbioaktivitet, som misstänkt, baserat på tidigare rapporter med andra metoder. Vi upptäckte överraskande hög östrogenaktivitet i extrakt av fo-ti som inte tidigare rapporterats. Kasta trädbär, svart cohosh och dong quai hade inte mätbar aktivitet med denna metod. Vi upptäckte också att avlägsnande av en glykongrupp från soja ökar dess östrogenbioaktivitet avsevärt. Vi drar slutsatsen att denna rekombinanta cellbioanalys för östradiol kan användas för att mäta bioaktivitet i växtbaserade produkter. Beredningarna av studerat fo-ti hade östrogenaktivitet av 409 ± 55 pmol / liter östradiolekvivalenter per mikrogram ört, vilket är 1/300 av aktiviteten för 17p-östradiol. Kliniska studier pågår för att bestämma östrogenbioaktiviteten hos kvinnor som använder kosttillskott som innehåller dessa örter.

EN AV DE viktigaste frågorna för kvinnors hälsa gäller riskerna och fördelarna med östrogenersättningsterapi . Emellertid har kontinuerlig osäkerhet och brist på samförstånd om östrogenersättningsterapi fått många kvinnor att söka alternativa källor till östrogen, inklusive naturläkemedel (1). Det finns flera örter som används i de tillgängliga beredningarna, varav de vanligaste inkluderar: rödklöver, dong quai, cohosh, soja, lakrits och kysk trädbär. Trots betydande historia av örter som används för deras östrogenliknande effekter, har det nyligen rapporterats om mätning av östrogen aktivitet i några av dessa örter (2–9). Dessutom har det inte gjorts många kontrollerade studier av effekten av dessa preparat hos kvinnor. Det finns ingen konsensus om användningen, doseringen eller den långsiktiga säkerheten för dessa tillskott.

Tidigare har vi visat användningen av en rekombinant cellbioanalys för östradiol för att bedöma de mycket låga nivåerna av östradiol i serum hos barn och postmenopausala kvinnor (10–16). Denna analys mäter östrogenaktivitet genom bindning av östrogenreceptor (ER) a i ett jästsystem transformerat med en plasmid som kodar östrogenresponselement och en plasmid som kodar för ERa (17). Med hjälp av en anpassning av denna metod har vi försökt bedöma östrogenens bioaktivitet i följande örter: rödklöver (Trifolium pretense L.), dong quai (Angelica sinensis), svart cohosh (Cimicifuga racemosa), soja, lakrits (Glycyrrhiza glabra ), kysk trädbär (Vitex agnus-castus L.), fo-ti (Polygonum multiflorum) och humle (Humulus lupulus L.).

Material och metoder

Örtextraktion

Kasta trädbär, svart cohosh, rödklöver, dong quai, fo-ti, lakrits, humle, soja och sojaglykon (SoyA) analyserades med avseende på östrogenaktivitet enligt följande. Torkade örtextrakt erhölls från Natural Alternative International (San Marcos, CA) innan de blandades i kapslar med kosttillskott. Sextio milligram av varje ört användes för extraktion, med undantag av soja och SoyA, för vilka 3 mg användes. Alla örter extraherades med 2 ml metanol, förutom lakrits, som extraherades med 2 ml eter. Ört och lösningsmedel vortexades i 2 minuter och centrifugerades vid 3000 rpm under 10 minuter. Supernatanten avlägsnades och filtrerades genom ett 0,45-um glassprutfilter och lagrades vid rumstemperatur för användning.

Östrogenanalys

Bioanalysen för östradiol beskrevs tidigare i detalj (17). Östrogenaktivitet definieras av ER-bindning i ett genetiskt konstruerat jästsystem. Kortfattat använder den en stam av Saccharomyces cerevisiae som transformeras med två plasmider. En plasmid innehåller det humana ER-komplementära DNA, och den andra innehåller ett östrogenresponselement uppströms jäst-iso-1-cytokrom C-promotorn sammansmält med strukturgenen för β-galaktosidas. Den transformerade jästen odlas i selektiva medier i närvaro av örtextrakt. P-galaktosidasaktivitet analyseras och omvandlas till östradiolekvivalenta enheter genom linjär interpolering från en standardkurva konstruerad genom tillsats av kända mängder östradiol till analysmedia. Känsligheten för bioanalysen var 0,02-2 pg / ml (0,07-7 pmol / liter) under studietiden.

Statistik

Varje örtextrakt analyserades i tre exemplar och upprepades under tre på varandra följande analyser. Estradiolekvivalenter beräknades genom interpolering från en standardkurva konstruerad i analysmedia med kända mängder av 17p-östradiol. (Figur 1). Därför uttrycks resultaten i östradiolekvivalenter i pikomol per liter per mikrogram torr örtextrakt. Alla data uttrycks som medelvärdet ± sd. Jämförelser mellan grupper gjordes med användning av en multivariat ANOVA med post-hoc-korrigering (minst statistisk skillnad). Skillnader betraktades som signifikanta vid P < 0,05.

Resultat

Mätbart östrogen aktivitet demonstrerades i rödklöver, fo-ti, humle, soja och lakrits, medan ingen hittades i kasta trädbär, svart cohosh eller dong quai (tabell 1). Såsom visas i fig. 2 visade sig glykosylerad soja (SoyA) bland de örter med detekterbar östrogenaktivitet innehålla den högsta mängden östradiolekvivalenter, jämfört med de andra, inklusive soja. Betydande östrogenbioaktivitet identifierades också i rödklöver och fo-ti. Lakrits och humle hade signifikant lägre östrogenaktivitet än fo-ti. Detektering av östrogenaktivitet i fo-ti har inte rapporterats tidigare.