Lady Macbeth este unul dintre cele mai faimoase și înspăimântătoare personaje feminine ale lui Shakespeare. Când o vedem pentru prima dată, ea complotează deja uciderea lui Duncan și este mai puternică, mai nemiloasă și mai ambițioasă decât soțul ei. Pare pe deplin conștientă de acest lucru și știe că va trebui să-l împingă pe Macbeth să comită o crimă. La un moment dat, și-a dorit să nu fie o femeie, astfel încât să o poată face singură. Tema relației dintre gen și putere este esențială pentru caracterul LadyMacbeth: soțul ei implică faptul că este un suflet masculin care locuiește într-un corp feminin, ceea ce pare să lege masculinitatea de ambiție și violență. Cu toate acestea, Shakespeare pare să o folosească pe ea, și pe vrăjitoare, pentru a submina ideea lui Macbeth conform căreia „puterea nedescoperită ar trebui să compună / Nimic în afară de bărbați” (1.7.73-74). Femeile, implică piesa, pot fi la fel de ambițioase și crude ca bărbații, constrângerile sociale le refuză mijloacele de a urmări aceste ambiții pe cont propriu.

Lady Macbeth își manipulează soțul cu o eficiență remarcabilă, dominând toate obiecțiile sale; când ezită la crimă, își pune întrebări repetate despre bărbăția sa, până când simte că trebuie să comită uciderea pentru a se dovedi. Forța remarcabilă a persistenței lui Will Macbeth prin uciderea regelui – ea este cea care stabilește nervii soțului imediat după Totuși, după aceea, ea începe o alunecare lentă spre nebunie – la fel cum ambiția o afectează mai puternic decât Macbeth înainte de crimă, la fel vinovăția o afectează mai puternic după aceea. La sfârșitul piesei, ea a fost redusă la somnambulism prin castel, încercând cu disperare să spele o pată de sânge invizibilă. Odată ce simțul vinovăției vine acasă la relaxare, sensibilitatea Lady Macbeth devine slăbiciune și nu poate face față. În mod semnificativ, ea (aparent) se sinucide, semnalând incapacitatea ei totală de a face față moștenirii crimelor lor.