Function

Intervalul post-mortem (PMI) a fost clasificat în mod tradițional în trei etape – imediat, timpuriu și târziu.

PMI imediat

În perioada imediată, organismul suferă modificări biochimice și fiziologice rapide care sunt cauzate în principal de absența circulației sângelui și de pierderea mecanismelor de reglare. Aceste modificări sunt detectabile în principal în ochi și piele. În ochi, „camionarea” sau segmentarea vaselor de sânge retiniene este unul dintre primele semne observabile. Acest semn se prezintă ca o pauză în coloana continuă de sânge la examinarea oftalmoscopică a ochilor și apare de obicei în jumătate de oră și uneori poate dura până la 2 ore după moarte. Celelalte modificări ale ochilor, în faza post-mortem imediată, includ pierderea presiunii intraoculare, precum și înnorarea corneei. Presiunea intraoculară scade drastic după moarte și atinge 4 mmHg sau mai puțin în decurs de 6 ore după moarte. Corneea începe să se tulbure în decurs de 2 ore după moarte și de obicei previne examinarea intraoculară cu un oftalmoscop. Pielea își pierde elasticitatea și luciul în primele câteva ore după moarte și pare palidă. Cu toate acestea, examinarea histologică a pielii nu prezintă modificări morfologice în decurs de 6 ore PMI. Alte examinări arată o lipsă de modificări celulare sau biochimice în decurs de 3 până la 6 ore post-mortem. Golirea conținutului gastric este o altă metodă utilizată pentru estimarea intervalului post-mortem. Mesele ușoare mici sunt golite de stomac în decurs de 1 până la 3 ore, iar timpul de consum, dacă este cunoscut – împreună cu volumul și tipul de masă, poate fi utilizat pentru a estima intervalul post-mortem. Prin urmare, faza post-mortem imediată poate fi denumită intervalul post-mortem între moartea somatică și celulară, în decurs de 2 până la 3 ore după moarte și denotă de obicei o lipsă de modificări discernabile în morfologie sau histo-chimie.

PMI precoce

Faza post-mortem precoce este probabil cea mai importantă perioadă de timp pentru estimarea PMI, deoarece majoritatea cazurilor medico-legale sunt examinate în această perioadă de timp. Această perioadă este, de asemenea, în care estimarea timpului de la moarte este cea mai relevantă în stabilirea cronologiei evenimentelor și dezvoltarea unei teorii a circumstanțelor morții. Această perioadă durează de la 3 la 72 de ore după moarte. Faza post-mortem timpurie este cel mai frecvent estimată utilizând triada clasică a modificărilor post-mortem – rigor mortis, livor mortis și algor mortis.

Algor Mortis

Algor mortis este răcirea corpului după moarte, în principal datorită pierderii reglării homeostatice de către hipotalamus, coroborată cu pierderea căldurii în mediu prin conducere, convecție și radiații. Algor mortis este cea mai precisă metodă de estimare a TSD în faza post-mortem timpurie. Cu toate acestea, implică o procedură greoaie și necesită cunoștințe și cercetări intensive înainte de a fi utilizată cu exactitate în domeniu; acest lucru se datorează numeroșilor factori care afectează gradientul de temperatură dintre temperatura corpului și temperatura ambiantă, cel mai inerent fiind diferențele de temperatură ale diferitelor localități în diferite momente de timp. O regulă generală afirmă că există o scădere de 1,5 grade F la fiecare oră. Au fost dezvoltate mai multe diagrame, formule și algoritmi pentru a estima PMI; Nomograma lui Henssge fiind cea mai răspândită. Estimarea TSD utilizând algoritmul măsoară temperaturile rectale și, deși au fost utilizate în mod constant, nomogramele pentru temperaturile creierului au fost, de asemenea, dezvoltate de Brinkmann și colab. în 1976 și 1978 și de Henssge și colab. în 1984.

Rigor Mortis

Rigor mortis este rigidizarea post-mortem a mușchilor, cauzată de epuizarea adenozin trifosfatului (ATP) din mușchi, care este necesară pentru descompunerea a filamentelor de actină-miozină din fibrele musculare. Actina și miozina sunt componente ale fibrei musculare și formează o legătură covalentă în timpul contracției. Încetarea alimentării cu oxigen determină oprirea respirației aerobe în celule și duce la lipsa producției de ATP. Rigor mortis începe imediat după moarte și este de obicei văzut într-o secvență cunoscută sub numele de „marș al rigurozității” și numită și Legea lui Nysten. În timp ce rigor mortis se dezvoltă simultan în toate țesuturile musculare din corp, voluntar și involuntar, dimensiunea mușchiului determină perceptibilitatea modificărilor de către examinator. Mușchii mai mici de pe față – în jurul ochilor, din jurul gurii etc. sunt mușchii unde apare prima dată rigor mortis, urmat de rigor mortis al mușchilor din mâini și membrele superioare și în cele din urmă apare în mușchii mari ai membrelor inferioare. Rigor mortis apare la aproximativ 2 ore după moarte în mușchii feței, progresează la membre în următoarele câteva ore, completându-se între 6 și 8 ore după moarte.Rigor mortis rămâne apoi încă 12 ore (până la 24 de ore după moarte) și apoi începe să dispară. În ultima fază a Rigor Mortis, complexul actină-miozină care s-a format începe să se dezintegreze datorită proteolizei, rezultând dizolvarea rigidității. Acest proces începe în toate celulele în același timp, totuși, la fel ca și cu aspectul, această schimbare este perceptibilă mai întâi în mușchii mai mici ai feței, urmată de mușchii membrelor superioare și, în cele din urmă, mușchii mari din membrele inferioare. Rigor mortis dispare în general în 36 de ore după moarte, urmată de o fază cunoscută sub numele de flaciditate secundară.

Livor Mortis

Ultima schimbare în triada clasică este livor mortis, care este purpuriu -decolorarea albastră a pielii în părțile dependente ale corpului, datorită colectării de sânge în vasele pielii, cauzată de atracția gravitațională. Hipostaza se dezvoltă ca pete de decolorare în decurs de o jumătate de oră până la 2 ore, aceste pete se unesc apoi pentru a forma plasturi mai mari, care se combină în continuare pentru a forma o decolorare uniformă a părților dependente ale corpului care nu a fost supusă presiunii, care apare de la 6 până la 12 ore. Decolorarea devine „fixă” după o anumită perioadă, ca urmare a dezintegrării celulelor sanguine și a infiltrării hemoglobinei. Această fixare este confirmată prin aplicarea presiunii cu degetele mari și este utilizată în mod tradițional pentru a indica un PMI mai mare de 12 ore. Această metodă de estimare a PMI a necesitat o abordare obiectivă și modernă, conducând la dezvoltarea metodelor colorimetrice pentru estimarea PMI din livor mortis.

Analiza histo-morfologică

Alte metode de estimarea TSD în faza incipientă include analiza histo-morfologică și bio-chimică. Numărul total și diferențial de sânge, precum și examenul morfologic microscopic al sângelui, a fost descris ca o metodă de estimare a TSD. Toate celulele sanguine nu au fost identificabile după 84 de ore după moarte. În mod similar, s-a constatat că numărul de celule sanguine scade dincolo de 84 de ore după moarte. Studiile histologice ale pielii au arătat că modificările degenerative apar în piele la 6 ore după moarte și apare mai întâi ca vacuolare a corpului bazal și a spinosului. Separarea dermo-epidermică se observă la 9 ore după moarte, în timp ce derma prezintă rarefacție și dezintegrare la 6 și, respectiv, la 18 ore după moarte. Glicogenul din membrana bazală a glandelor sudoripare, citoplasma celulelor secretoare, precum și celulele canalelor se epuizează în 3 ore PMI și conduce la celule PAS-negative pe histologie. Cu toate acestea, membrana bazală continuă să prezinte o colorare magenta până la 18 ore post-mortem. Glandele sudoripare ecrine prezintă vacuolare după 3 până la 4 ore de PMI, iar celulele par să se fi dezintegrat complet la 15 ore după moarte. Glandele sebacee par normale până la 18 ore post-mortem, văzute ca o separare a straturilor și dezintegrarea papilei părului. Studiile au arătat, de asemenea, că pleocitoza poate fi utilizată pentru a estima PMI utilizând o ecuație polinomială de ordinul trei. Celulele sunt în primul rând limfocite cu o fracțiune semnificativă de macrofage, care devin vacuolate și neidentificabile după 12 ore.

Evaluarea biochimică

Evaluarea biochimică a sângelui nu este semnificativă în post-mortem imediat fază din cauza lipsei morții celulare. Pe de altă parte, moartea celulară face evaluarea biochimică a sângelui în faza incipientă extrem de dificilă. De asemenea, există redistribuirea electroliților din celule în plasmă și ser, rezultând modificări variabile ale nivelurilor acestor electroliți. Aceste variații și implicațiile lor sunt studiate în domeniul emergent al thanato-chimiei. Evaluarea biochimică a fost utilă pentru estimarea PMI din umorul vitros, lichid sinovial, lichid pericardic, urină și lichid cefalorahidian. Cu toate acestea, trebuie luați în considerare numeroși factori atunci când se examinează PMI pe baza biochimiei, incluzând, dar fără a se limita la, vârsta, sexul, fondul biologic, stilul de viață, cauza decesului și o gamă întreagă de alți factori intrinseci și extrinseci. Doar câțiva markeri biochimici (din 388) s-au dovedit a avea suficiente investigații în legătură cu aceste considerații – și anume potasiu, sodiu, uree, precum și clorură, magneziu, hipoxantină și troponină cardiacă. să fie alarmant, marcatorii biochimici 0 (zero) fiind considerați că au avut cercetări adecvate și adecvate pentru utilizare. Șase s-au dovedit a fi cercetate corespunzător, dar nu sunt adecvate pentru utilizare practică. Între timp, 18 s-au dovedit a fi puțin cercetate și nu erau adecvate pentru aplicare, iar alți 364 markeri biochimici nu aveau informații suficiente.

Reacții supra-vitale

Reacții supra-vitale au fost, de asemenea, propuse ca mijloc de estimare a PMI. Prin urmare, determinarea perioadei de supra-vitalitate poate ajuta la estimarea PMI.Pentru această metodă, Madea definește PMI în patru etape – perioada de latență, în care, în ciuda opririi circulației, țesutul efectuează în continuare respirație aerobă până la epuizarea depozitelor sale – perioada de supraviețuire, unde există pierderea funcției țesutului, dar acestea pot să fie reactivat folosind stimuli externi, de exemplu, stimularea electrică a nervilor – perioada de resuscitare, unde capacitatea țesutului de a se recupera este complet pierdută, – și perioada supra-vitală. Madea definește supra-vitalitatea ca fiind perioada de supraviețuire a țesutului după ischemie completă, ireversibilă. Acest concept afirmă că perioada de supraviețuire cuprinde perioada de latență, perioada de resuscitare cuprinde atât perioada de latență, cât și perioada de supraviețuire, iar perioada de supra-vitalitate include toate celelalte trei. Supra-vitalitatea este, de asemenea, diferită de perioada de resuscitare prin aceea că țesutul este excitabil, indiferent de recuperarea funcției. De exemplu, perioada de resuscitare a mușchilor scheletici este aproximativă de 2 până la 3 ore, dar perioada supravitală în unele cazuri se poate extinde la 20 de ore. În mod similar, mușchii cardiaci au o perioadă de resuscitare de 3,5 până la 4 minute, în timp ce perioada supravitală se poate extinde până la 2 ore. O metodă pentru estimarea PMI a fost dezvoltată utilizând excitabilitatea electrică a Orbicularis oculi folosind electrozi de suprafață. Un raport dintre timpul de relaxare și forța maximă, numit timp de relaxare legat de forță, sa dovedit a fi fiabil pentru estimarea PMI. De asemenea, este important să se ia în considerare super-sensibilitatea țesutului în faza imediat post-mortem, numită fenomenul lui Zsako. Prin urmare, reacția supra-vitală examinează contracția idio-musculară sau locală și nu contracția întregului mușchi.

PMI târziu

Faza tardivă post-mortem este perioada atunci când țesutul corpului începe să se dezintegreze și este descris în primul rând ca descompunere sau putrefacție, formare adipoceră, mumificare sau scheletonizare. Țesutul complex din corp începe să se dezintegreze în forme moleculare mai simple ca urmare a descompunerii țesutului de către enzima sau bacteriile corpului, precum și bacteriile care colonizează rămășițele după moarte. Corpul suferă în principal descompunere sau putrefacție, rezultând decolorare verzuie, balonare datorită formării gazelor și necroză lichefactivă. Descompunerea rămășițelor depinde de climă, anotimp, greutatea corporală și îmbrăcăminte. Descompunerea se poate împărți în cinci etape – descompunere proaspătă, timpurie, descompunere avansată, scheletonizare și descompunere extremă.

Faza proaspătă

Faza proaspătă poate începe încă din 24 de ore și până târziu la 7 zile după moarte, în special în lunile mai reci de iarnă. Această fază nu prezintă nicio activitate de insectă, în afară de depunerea ouălor de mușchi în cavități și zone de dehiscență tisulară. Depunerea ouălor a fost documentată la pacienții vii, în special la subiecții imobili și debilitați.

Faza de descompunere timpurie

Faza de descompunere timpurie începe cu apariția alunecării pielii și a căderii părului. Aceste modificări încep de obicei din prima zi după moarte până la cinci zile post-mortem. De asemenea, viermii încep să apară pe corp, începând cu a doua zi post-mortem; corpul apare verzui-cenușiu și prezent marmorat (unele părți ale corpului pot părea încă roz). Fosa iliacă dreaptă este prima parte a corpului care prezintă decolorare verzuie și poate fi văzută încă din a doua zi post-mortem. Acest lucru se datorează poziției relativ superficiale a cecului. Extremitățile apar maronii odată cu uscarea pielii, în special peste degete, nas și urechi, începând de obicei în a doua zi post-mortem; corpul pare verzui cu balonări distincte. Decolorarea verzuie, care a început la fosa iliacă dreaptă, progresează pentru a cuprinde întregul abdomen, cu balonare simultană a abdomenului, care poate începe din nou în a doua zi. Balonarea avansează către restul trunchiului și, ulterior, asupra corpului, rezultând crepitații pe tot corpul la manipulare. Această fază este, de asemenea, asociată cu purjarea – eliberarea fluidului de descompunere din orificii – și un miros puternic neplăcut. Balonarea poate fi văzută încă la trei zile după moarte și, de obicei, dispare până la a doua săptămână post-mortem, din cauza întreruperii gazelor abdominale; Corpul pare verzui negru până în a doua săptămână; și, în cele din urmă, corpul apare negru-maroniu cu aspectul pielii al pielii. Această etapă este de obicei observată până la sfârșitul primei luni, dar poate fi prelungită până la două luni. Țesutul subiacent apare, de asemenea, întunecat, cu textura care se transformă într-o pastă vâscoasă și slabă. Între a zecea zi și sfârșitul primei luni, activitatea larvei continuă sub pielea pielei, pielea desicându-se în continuare pentru a forma o coajă pielei întărită, cu pierderea țesuturilor moi subiacente.

Faza avansată de descompunere

Faza avansată de descompunere începe cu apariția pielii slăbite și cu prăbușirea cavității abdominale. Corpul prezintă, de asemenea, o infestare extinsă cu viermi. Aceste modificări apar de obicei la a patra zi post-mortem, dar pot începe până la zece zile după moarte. Pierderea țesuturilor moi, inclusiv pierderea pielii pielei deshidratate, duce la expunerea a mai puțin de jumătate din materialul osos. Această fază este de obicei asociată cu prezența cazurilor de pupă, precum și cu apariția mucegaiurilor peste corp și îmbrăcăminte; acest lucru apare de obicei în a doua lună, dar poate să apară la șase până la nouă luni post-mortem. Desicarea pielii exterioare ar putea însoți retenția structurală a organelor interne sau poate fi însoțită de autoliză și pierderea organelor interne. Descompunerea poate progresa rapid în rămășițele îngropate sau în rămășițele rămase într-un mediu cu umiditate ridicată, rezultând în activitate extremă a viermilor, autoliză accelerată și ar putea progresa direct către scheletonizare sau formare adipoceră, fără deshidratare și mumificare a pielii și a țesutului exterior. Rămășițele pot suferi fie saponificare, fie desicare, numite formare adipocere și respectiv mumificare, în funcție de mediul și condițiile prezente. Prezența unui mediu cald, umed și lipsit de oxigen favorizează dezvoltarea adipocerului – o substanță cerată care rezultă din hidroliza bacteriană anaerobă a grăsimii corporale. Organismul principal responsabil pentru formarea adipocerului este Clostridium perfringens, cauzând agregarea cristalului de acid gras, rezultând pierderea detaliilor celulare, precum și pierderea epidermei. Formarea adipocerului și durata timpului depind în primul rând de pH-ul, temperatura, umezeala și lipsa de oxigen din mediu.

Faza de scheletizare

Faza de scheletizare are ca rezultat expunerea a mai mult mai mult de jumătate din elementele scheletice, care ar putea demonstra încă țesut moale care este încă atașat. Cu toate acestea, scheletizarea este de obicei asociată cu țesut deshidratat sau adipocer peste mai puțin de jumătate din corp. Țesutul desecat apare cel mai frecvent la atașamentele musculare sau ligamentare de-a lungul coloanei vertebrale, precum și la capetele oaselor lungi. Între timp, adipocere este frecvent observată peste coapse, având depozite de grăsime subcutanate ridicate. Această etapă apare la două luni după moarte, deși prezintă de obicei între două și nouă luni post-mortem. Continuarea descompunerii duce la expunerea întregului material osos, cu doar câteva materiale grase lăsate în urmă sau expunând oasele uscate; acest lucru se observă de obicei după șase luni de expunere, deși sa raportat că a avut loc încă din a treia săptămână. Această etapă poate dura ani de zile dacă elementele nu sunt expuse, așa cum se vede în rămășițele îngropate sau rămășițele găsite în interior.

Faza de descompunere extremă

Faza descompunerii extreme este văzută doar în rămășițe care au fost expuse mediului și duc la eroziunea elementelor scheletice. Această eroziune începe cu procesul de albire a oaselor și este observată în mod obișnuit la șase luni de la expunere, deși s-a documentat că apare încă din două luni după moarte și până la doi ani și jumătate după mortem. Elementele scheletice suferă o degenerare suplimentară a structurii corticale, rezultând o pierdere metafizară a oaselor lungi și expunerea părții spongioase a oaselor spongioase; acest lucru este văzut în mod obișnuit între un an și un an și jumătate după moarte, deși sa raportat că a avut loc încă din a patra lună. S-a raportat că pierderea metafizară a avut loc la PMI de cinci ani și jumătate. perioade post-mortem tardive. Există două metode de estimare care utilizează entomologia criminalistică – bazată pe succesiune și bazată pe dezvoltare. Într-o abordare bazată pe succesiune, se alege un model de succesiune adecvat pentru utilizare, unul care corespunde condițiilor de mediu, inclusiv circumstanțelor morții. Prin urmare, este necesară cercetarea criminalistică a efectului factorilor de mediu asupra descompunerii și succesiunii insectelor. Mañas-Jordá a demonstrat că diferiți taxoni s-au dovedit a fi predominanți pe baza condițiilor de mediu. Au fost examinate diversitatea speciilor, precum și numărul de indivizi. Ei nu au detectat nicio asociere a speciilor cu stadiile I și II de descompunere, trei specii asociate cu stadiul III, două specii asociate stadiului IV și o specie asociată cu stadiul V la rezervația naturală Huitepec.În orașul San Cristóbal de las Casas, s-a găsit că patru specii sunt asociate cu stadiul II, trei specii s-au găsit asociate cu stadiul III, o singură specie Chrysomyarufifacies (Macquart; Diptera: Calliphoridae) și Fannia sp1 asociate cu stadiul IV și în cele din urmă, Stilpon sp1 s-a găsit asociat cu stadiul V.

Abordarea bazată pe dezvoltare analizează prezența diferitelor etape ale insectei pe corp, precum și în zona înconjurătoare, pentru a ajuta la estimarea PMI. Matuszewski a folosit L. caesar (Diptera: Calliphoridae), Thanatophilus sinuatus și N. littoralis (Coleoptera: Silphidae) în cercetările sale pentru a demonstra că prezența unui stadiu de dezvoltare și absența etapelor de dezvoltare ulterioare ale insectelor carioase, ar putea fi utilizate în coroborat cu estimarea intervalului lor de pre-apariție (PAI) pentru a dezvolta o estimare fiabilă a PMI. Prin urmare, este esențial să se stabilească valori PAI cunoscute pentru diferite insecte din mediul în curs de examinare.

Evaluare moleculară

Progresele recente în biologia moleculară au condus la diverse progrese în estimarea PMI. Degenerarea ARNm, ADN și proteine este evaluată și poate fi utilizată pentru a estima PMI. Transcrierile ARN s-au dovedit a fi cele mai relevante datorită degenerării rapide și a corelației temporale. Studii multiple au demonstrat o corelație liniară între PMI și degenerare. S-a constatat că această corelație este dependentă de temperatură și țesut.

Un studiu din Porto, Portugalia a examinat 11 transcrieri genetice pentru corelația cu TSD. 8 țesuturi murine au fost împărțite în trei grupuri pe baza stabilității ARN – primul grup (I) cuprinzând probe de țesut din inimă, splină și plămâni, al doilea grup (II) format din cvadriceps femural, ficat și stomac și al treilea grup (III) Pancreas și piele. Probele din grupele I și II au fost analizate în serie. Analiza a arătat că degenerescența ARN a fost dependentă de timp pentru întreaga perioadă de 11 ore, deși nicio semnificație statistică nu a fost demonstrabilă în primele patru ore. Cercetătorii au selectat 11 gene pentru analiza PCR cantitativă. În timp ce ARN-ul din inimă sa dovedit a fi cel mai stabil, nu a arătat nicio corelație cu PMI. În total, s-au găsit șase gene care se corelează cu PMI, patru în cvadricepsul femural (Actb, Gapdh, Ppia și Srp72) și două gene în ficat (Alb și Cyp2E1). Modele matematice au fost dezvoltate pentru a estima PMI cu o eroare medie de 51,4 minute.