Lady Macbeth is een van Shakespeare’s beroemdste en meest angstaanjagende vrouwelijke personages. Als we haar voor het eerst zien, beraamt ze al een complot van Duncan, en ze is sterker, meedogenlozer en ambitieuzer dan haar echtgenoot. Ze lijkt zich hiervan volledig bewust en weet dat ze Macbeth tot moord zal moeten dwingen. Op een gegeven moment wenste ze dat ze geen vrouw was, zodat ze het zelf kon doen. Dit thema van de relatie tussen geslacht en macht is de sleutel tot het karakter van Lady Macbeth: haar man impliceert dat ze een mannelijke ziel is die een vrouwelijk lichaam bewoont, dat mannelijkheid lijkt te koppelen aan ambitie en geweld. Shakespeare lijkt haar, en de heksen, echter te gebruiken om Macbeths idee te ondermijnen dat ‘onverschrokken moed zou moeten zijn / Niets dan mannen’ (1.7.73-74). Deze sluwe vrouwen gebruiken vrouwelijke methoden om macht te bereiken – dat wil zeggen manipulatie – om te bevorderen hun zogenaamd mannelijke ambities. Vrouwen, zo impliceert het stuk, kunnen net zo ambitieus en wreed zijn als mannen, maar de sociale beperkingen ontzeggen hen de middelen om deze ambities zelf na te streven.

Lady Macbeth manipuleert haar man met opmerkelijke al zijn bezwaren; wanneer hij aarzelt om te vermoorden, twijfelt hij herhaaldelijk aan zijn mannelijkheid totdat hij voelt dat hij een moord moet plegen om zichzelf te bewijzen.Lady Macbeths opmerkelijke wilskracht houdt stand door de moord op de koning – zij is het die de zenuwen van haar man kalmeert onmiddellijk nadat de misdaad is ge Maar daarna begint ze langzaam af te glijden naar waanzin – net zoals ambitie haar sterker treft dan Macbeth vóór de misdaad, zo plaagt haar schuldgevoel haar daarna sterker. Tegen het einde van het stuk is ze gereduceerd tot slaapwandelen door het kasteel, wanhopig in een poging een onzichtbare bloedvlek weg te spoelen. Als het schuldgevoel eenmaal thuiskomt, wordt lady Macbeths gevoeligheid een zwakte en kan ze het niet meer aan. Het is veelbetekenend dat ze (blijkbaar) zelfmoord pleegt, waarmee ze aangeeft dat ze totaal niet in staat is om met de erfenis van hun misdaden om te gaan.