여성 건강 문제에서 가장 중요한 문제 중 하나 에스트로겐 대체 요법의 위험과 이점. 에스트로겐 대체 요법에 대한 지속적인 불확실성과 합의 부족으로 인해 많은 여성들이 약초 요법을 포함한 대체 에스트로겐 공급원을 찾고 있습니다. 우리는 허브의 에스트로겐 생물 활성을 측정하기 위해 재조합 세포 생물 분석법을 적용했습니다. 우리는 레드 클로버, 동 콰이, 블랙 코호시, 콩, 감초, 순결 나무 베리, 포티, 홉의 에스트로겐 생체 활성을 시험관 내에서 연구했습니다. 대두, 클로버, 감초 및 홉은 다른 방법을 사용한 이전 보고서에 따르면 의심되는 바와 같이 측정 가능한 에스트로겐 생물 활성이 다량 있습니다. 우리는 이전에보고되지 않은 fo-ti 추출물에서 놀랍도록 높은 에스트로겐 활성을 발견했습니다. Chaste tree berry, black cohosh, dong quai는이 방법으로 측정 가능한 활동이 없었습니다. 우리는 또한 콩에서 글리코 인 그룹을 제거하면 에스트로겐 생물 활성이 크게 증가한다는 것을 발견했습니다. 우리는 에스트라 디올에 대한이 재조합 세포 바이오 어 세이가 허브 제품의 생물학적 활성을 측정하는 데 사용될 수 있다고 결론지었습니다. 연구 된 fo-ti 제제는 약초 마이크로 그램 당 409 ± 55 pmol / l 에스트라 디올 당량의 에스트로겐 활성을 가졌으며 이는 17β- 에스트라 디올 활성의 1/300입니다. 이러한 허브를 함유 한식이 보조제를 사용하여 여성의 에스트로겐 생체 활성을 결정하기위한 임상 연구가 진행 중입니다.

여성 건강에서 가장 중요한 문제 중 하나는 에스트로겐 대체 요법의 위험과 이점에 관한 것입니다. . 그러나 지속적인 불확실성과 표준 에스트로겐 대체 요법에 대한 합의 부족으로 인해 많은 여성들이 한약 요법을 포함한 대체 에스트로겐 공급원을 찾게되었습니다 (1). 사용 가능한 준비에 사용되는 몇 가지 허브가 있으며 그중 가장 일반적인 허브는 레드 클로버, 동키, 코호시, 콩, 감초 및 순결 나무 열매입니다. 에스트로겐 유사 효과에 사용 된 허브의 상당한 역사에도 불구하고 최근에야 이러한 허브 중 일부에서 에스트로겐 활성을 측정 한보고가있었습니다 (2-9). 또한 이러한 제제가 여성에게 미치는 영향에 대한 통제 된 연구가 많지 않습니다. 이러한 보충제의 사용, 투여 량 또는 장기 안전성에 대한 합의는 아직 없습니다.

이전에는 매우 낮은 수준의 에스트라 디올을 평가하기 위해 에스트라 디올에 대한 재조합 세포 바이오 어 세이의 사용을 입증했습니다. 소아 및 폐경 후 여성의 혈청 (10-16). 이 분석은 에스트로겐 반응 요소를 코딩하는 플라스미드와 ERα를 코딩하는 플라스미드로 형질 전환 된 효모 시스템에서 에스트로겐 수용체 (ER) α의 결합을 통해 에스트로겐 활성을 측정합니다 (17). 이 방법론을 적용하여 레드 클로버 (Trifolium pretense L.), 동 퀘이 (Angelica sinensis), 블랙 코호시 (Cimicifuga racemosa), 콩, 감초 (Glycyrrhiza glabra) 허브에서 에스트로겐의 생체 활성을 평가하려고했습니다. ), chaste tree berry (Vitex agnus-castus L.), fo-ti (Polygonum multiflorum) 및 홉 (Humulus lupulus L.).

재료 및 방법

허브 추출

Chaste tree berry, black cohosh, red clover, dong quai, fo-ti, licorice, hops, soy, soy aglycone (SoyA)의 에스트로겐 활성을 다음과 같이 분석했습니다. 건조 허브 추출물은 Natural Alternative International (San Marcos, CA)에서 섭취 한 후식이 보충제 캡슐로 배합했습니다. 추출에는 60mg의 각 허브가 사용되었으며, 콩과 SoyA는 3mg이 사용되었습니다. 감초를 제외한 모든 허브는 메탄올 2ml로 추출하였으며, 에테르 2ml로 추출 하였다. 허브와 용매를 2 분 동안 볼 텍싱하고 3000rpm에서 10 분 동안 원심 분리했습니다. 상청액을 제거하고 0.45μm 유리 주사기 필터를 통해 여과하고 사용을 위해 실온에서 보관했습니다.

에스트로겐 분석

에스트라 디올에 대한 생물학적 분석은 이전에 자세히 설명했습니다 (17). 에스트로겐 활성은 유전자 조작 된 효모 시스템에서 ER 결합에 의해 정의됩니다. 간단히 말하면, 두 개의 플라스미드로 형질 전환 된 Saccharomyces cerevisiae 균주를 사용합니다. 하나의 플라스미드는 인간 ER 상보 적 DNA를 포함하고 다른 하나는 β- 갈 락토시다 아제에 대한 구조적 유전자에 융합 된 효모 iso-1-cytochrome C 프로모터의 상류에 에스트로겐 반응 요소를 포함합니다. 형질 전환 된 효모는 허브 추출물의 존재하에 선택적 배지에서 성장합니다. β- 갈 락토시다 제 활성을 분석하고 알려진 양의 에스트라 디올을 분석 배지에 추가하여 구성된 표준 곡선으로부터 선형 보간법에 의해 에스트라 디올 등가 단위로 변환합니다. 생물 검정의 민감도는 연구 기간 동안 0.02–2 pg / ml (0.07–7 pmol / liter)였습니다.

통계

각 허브 추출물을 3 회 분석하고 3 회 연속 분석을 반복했습니다. Estradiol 등가물은 알려진 양의 17β-estradiol을 사용하여 분석 배지에서 구성된 표준 곡선에서 보간하여 계산했습니다. (그림 1). 따라서 결과는 건조 허브 추출물 마이크로 그램 당 리터당 피코 몰로 에스트라 디올 당량으로 표현됩니다. 모든 데이터는 평균 ± SD로 표시됩니다. 그룹 간의 비교는 사후 보정 (최소 통계적 차이)과 함께 다변량 ANOVA를 사용하여 이루어졌습니다. 차이는 P < 0.05에서 중요한 것으로 간주되었습니다.

결과

측정 가능한 에스트로겐 레드 클로버, 포티, 홉, 대두, 감초에서는 활성이 입증 된 반면, 순결 나무 열매, 블랙 코호시 또는 동키에서는 아무것도 발견되지 않았습니다 (표 1). 그림 2에서 볼 수 있듯이 에스트로겐 활성이 감지 된 허브 중에서 비 당화 콩 (SoyA)은 콩을 포함한 다른 허브에 비해 가장 많은 양의 에스트라 디올 당량을 함유하는 것으로 나타났습니다. 레드 클로버와 포티에서도 상당한 에스트로겐 생물 활성이 확인되었습니다. 감초와 홉은 fo-ti보다 에스트로겐 활성이 현저히 낮았습니다. fo-ti에서 에스트로겐 활동의 검출은 이전에보고 된 적이 없습니다.