L’un des problèmes les plus importants pour la santé des femmes les risques et les avantages de la thérapie de remplacement des œstrogènes. L’incertitude continue et le manque de consensus concernant la thérapie de remplacement des œstrogènes ont poussé de nombreuses femmes à rechercher d’autres sources d’œstrogènes, y compris des remèdes à base de plantes. Nous avons adapté un essai biologique de cellules recombinantes pour mesurer la bioactivité des œstrogènes dans les herbes. Nous avons étudié, in vitro, la bioactivité des œstrogènes dans le trèfle rouge, le dong quai, l’actée à grappes noires, le soja, la réglisse, la baie de chaste, le fo-ti et le houblon. Le soja, le trèfle, la réglisse et le houblon ont une grande quantité de bioactivité mesurable des œstrogènes, comme suspecté, sur la base de rapports précédents utilisant d’autres méthodes. Nous avons découvert une activité œstrogène étonnamment élevée dans des extraits de fo-ti non signalés auparavant. Les baies de chaste, l’actée à grappes noires et le dong quai n’avaient pas d’activité mesurable avec cette méthode. Nous avons également découvert que l’élimination d’un groupe glycone du soja augmente considérablement sa bioactivité œstrogène. Nous concluons que ce dosage biologique de cellules recombinantes pour l’estradiol peut être utilisé pour mesurer la bioactivité dans les produits à base de plantes. Les préparations de fo-ti étudiées avaient une activité œstrogène de 409 ± 55 pmol / litre d’équivalents œstradiol par microgramme d’herbe, soit 1 / 300e de l’activité du 17β-estradiol. Des études cliniques sont en cours pour déterminer la bioactivité des œstrogènes chez les femmes utilisant des compléments alimentaires contenant ces herbes.

L’UN DES problèmes les plus importants pour la santé des femmes concerne les risques et les avantages de la thérapie de remplacement des œstrogènes . Cependant, l’incertitude continue et le manque de consensus sur la thérapie de remplacement des œstrogènes standard ont conduit de nombreuses femmes à rechercher des sources alternatives d’œstrogènes, y compris des remèdes à base de plantes (1). Il existe plusieurs herbes utilisées dans les préparations disponibles, dont les plus courantes comprennent: le trèfle rouge, le dong quai, l’actée à grappes, le soja, la réglisse et la baie de chaste. Malgré des antécédents considérables d’herbes utilisées pour leurs effets semblables aux œstrogènes, ce n’est que récemment que des rapports ont fait état de mesures de l’activité œstrogénique dans certaines de ces herbes (2–9). De plus, il n’y a pas eu de nombreuses études contrôlées sur l’effet de ces préparations chez la femme. Il n’y a pas de consensus concernant l’utilisation, le dosage ou la sécurité à long terme de ces suppléments.

Auparavant, nous avons démontré l’utilisation d’un test biologique sur cellules recombinantes pour l’estradiol pour évaluer les très faibles niveaux d’estradiol dans le sérum des enfants et des femmes ménopausées (10–16). Ce test mesure l’activité des œstrogènes par la liaison du récepteur des œstrogènes (ER) α dans un système de levure transformé avec un plasmide codant des éléments de réponse œstrogéniques et un plasmide codant pour ERα (17). En utilisant une adaptation de cette méthodologie, nous avons tenté d’évaluer la bioactivité des œstrogènes dans les herbes suivantes: trèfle rouge (Trifolium pretense L.), dong quai (Angelica sinensis), actée à grappes noires (Cimicifuga racemosa), soja, réglisse (Glycyrrhiza glabra) ), baies de chaste (Vitex agnus-castus L.), fo-ti (Polygonum multiflorum) et houblon (Humulus lupulus L.).

Matériel et méthodes

Extraction d’herbes

Les baies de chaste, l’actée à grappes noires, le trèfle rouge, le dong quai, le fo-ti, la réglisse, le houblon, le soja et l’aglycone de soja (SoyA) ont été analysés pour l’activité œstrogène comme suit. Des extraits d’herbes séchées ont été obtenus auprès de Natural Alternative International (San Marcos, CA) avant d’être mélangés dans des capsules de complément alimentaire. Soixante milligrammes de chaque plante ont été utilisés pour l’extraction, à l’exception du soja et du soja, pour lesquels 3 mg ont été utilisés. Toutes les herbes ont été extraites avec 2 ml de methanol, à l’exception de la réglisse, qui a été extraite avec 2 ml d’éther. L’herbe et le solvant ont été vortexés pendant 2 min et centrifugés à 3000 tr / min pendant 10 min. Le surnageant a été prélevé et filtré à travers un filtre de seringue en verre de 0,45 μm et conservé à température ambiante pour utilisation.

Dosage des œstrogènes

Le dosage biologique de l’estradiol a été décrit précédemment en détail (17). L’activité œstrogène est définie par la liaison ER dans un système de levure génétiquement modifié. En bref, il utilise une souche de Saccharomyces cerevisiae qui est transformée avec deux plasmides. Un plasmide contient l’ADN complémentaire ER humain, et l’autre contient un élément de réponse œstrogène en amont du promoteur iso-1-cytochrome C de levure fusionné au gène de structure de la β-galactosidase. La levure transformée est cultivée dans des milieux sélectifs en présence d’extrait d’herbe. L’activité de la ß-galactosidase est dosée et convertie en unités équivalentes d’estradiol par interpolation linéaire à partir d’une courbe standard construite en ajoutant des quantités connues d’estradiol aux milieux de dosage. La sensibilité du test biologique était de 0,02 à 2 pg / ml (0,07 à 7 pmol / litre) pendant la durée de l’étude.

Statistiques

Chaque extrait d’herbe a été analysé en triple et répété sur trois tests consécutifs. Les équivalents d’estradiol ont été calculés par interpolation à partir d’une courbe standard construite dans des milieux d’essai avec des quantités connues de 17β-estradiol. (Fig. 1). Par conséquent, les résultats sont exprimés en équivalents d’estradiol en picomoles par litre et par microgramme d’extrait d’herbe sèche. Toutes les données sont exprimées en moyenne ± sd. Des comparaisons entre les groupes ont été effectuées à l’aide d’une ANOVA multivariée avec correction post hoc (différence statistique la plus faible). Les différences ont été considérées comme significatives à P < 0,05.

Résultats

Estrogénique mesurable l’activité a été démontrée dans le trèfle rouge, le fo-ti, le houblon, le soja et la réglisse, alors qu’aucune n’a été trouvée dans les baies de chaste, l’actée à grappes noires ou le dong quai (tableau 1). Comme le montre la figure 2, parmi ces herbes ayant une activité oestrogénique détectable, le soja aglycosylé (SoyA) s’est avéré contenir la plus grande quantité d’équivalents d’estradiol, par rapport aux autres, y compris le soja. Une bioactivité œstrogène considérable a également été identifiée chez le trèfle rouge et le fo-ti. La réglisse et le houblon avaient une activité œstrogène nettement inférieure à celle du fo-ti. La détection de l’activité des œstrogènes dans fo-ti n’a pas été rapportée précédemment.