Funksjon

Post mortem intervall (PMI) har tradisjonelt blitt klassifisert i tre trinn – umiddelbar, tidlig og sent.

Umiddelbar PMI

I den umiddelbare perioden gjennomgår kroppen raske biokjemiske og fysiologiske endringer som primært er forårsaket av fravær av blodsirkulasjon og tap av reguleringsmekanismer. Disse endringene kan hovedsakelig påvises i øynene og huden. I øynene er ‘trucking’ eller segmentering av retinalblodkar et av de første observerbare tegnene. Dette tegnet presenterer som en pause i den kontinuerlige blodkolonnen ved oftalmoskopisk undersøkelse av øynene, og forekommer vanligvis innen en halv time og kan noen ganger ta så lang tid som 2 timer etter døden. De andre endringene i øynene, i den umiddelbare post-mortem fasen, inkluderer tap av intraokulært trykk, samt skyet av hornhinnen. Det intraokulære trykket synker drastisk etter døden og når 4 mmHg eller mindre innen 6 timer etter døden. Hornhinnen begynner å skyne innen 2 timer etter døden og forhindrer vanligvis intraokulær undersøkelse med oftalmoskop. Huden mister sin elastisitet og glans i løpet av de første timene etter døden og virker blek. Histologisk undersøkelse av huden viser imidlertid ingen morfologiske endringer innen 6 timer PMI. Andre undersøkelser viser mangel på cellulære eller biokjemiske endringer innen 3 til 6 timer etter mortem. Tømming av mageinnhold er en annen metode som brukes for å estimere intervallet etter mortem. Små lette måltider tømmes fra magen innen 1 til 3 timer, og forbruketiden, hvis kjent – sammen med volum og type måltid, kan brukes til å estimere intervallet etter mortem. Den umiddelbare post mortem-fasen kan derfor betegnes som post mortem-intervallet mellom somatisk og cellulær død, innen 2 til 3 timer etter døden, og betegner vanligvis mangel på merkbare endringer i morfologi eller histokjemi. p>

Tidlig PMI

Den tidlige post mortem-fasen er trolig den viktigste tidsperioden for estimering av PMI ettersom de fleste medisinsk-juridiske saker blir undersøkt i denne tidsperioden. Denne perioden er også hvor estimering av tid siden død er mest relevant for å etablere tidslinjen for hendelser og utvikle en teori om dødsforhold. Denne perioden går fra 3 til 72 timer etter døden. Den tidlige post mortem-fasen estimeres hyppigst ved bruk av den klassiske triaden av endringer etter mortem – rigor mortis, livor mortis og algor mortis.

Algor Mortis

Algor mortis er kjøling av kroppen etter døden, hovedsakelig på grunn av tap av homeostatisk regulering av hypothalamus, i forbindelse med tap av varme til miljøet ved ledning, konveksjon og stråling. Algor mortis er den mest nøyaktige metoden for å estimere TSD i den tidlige post mortem-fasen. Imidlertid innebærer det en tungvint prosedyre og krever intensiv kunnskap og forskning før den kan brukes nøyaktig i felt; Dette skyldes de mange faktorene som påvirker temperaturgradienten mellom kroppstemperatur og omgivelsestemperatur, den mest iboende er forskjellene i temperaturene til forskjellige lokaliteter på forskjellige tidspunkter. En tommelfingerregel sier at det er en nedgang på 1,5 grader F hver time. Flere diagrammer, formler og algoritmer er utviklet for å estimere PMI; Henssges nomogram er det mest lærte. Estimeringen av TSD ved bruk av algor mortis måler rektal temperaturer, og mens de har blitt brukt konsekvent, er også nomogrammer for hjernetemperaturer utviklet av Brinkmann et al. i 1976 og 1978 og av Henssge et al. i 1984.

Rigor Mortis

Rigor mortis er post mortem-avstivning av muskler, forårsaket av uttømming av adenosintrifosfat (ATP) fra musklene, noe som er nødvendig for nedbrytningen av aktin-myosin-filamenter i muskelfibrene. Actin og myosin er komponenter i muskelfiberen og danner en kovalent binding under sammentrekning. Opphør av oksygentilførsel forårsaker stopp av aerob respirasjon i cellene og fører til mangel på produksjon av ATP. Rigor mortis starter umiddelbart etter døden og blir vanligvis sett i en sekvens kjent som «mars of rigor» og også kalt Nystens lov. Mens rigor mortis utvikler seg samtidig i alt muskelvev i kroppen, frivillig og ufrivillig, bestemmer størrelsen på muskelen synlighet av endringer fra undersøkeren. Mindre muskler over ansiktet – rundt øynene, rundt munnen osv. er musklene der rigor mortis først dukker opp, etterfulgt av rigor mortis i musklene i hendene og overekstremiteter og til slutt vises i store muskler i underekstremitetene. Rigor mortis dukker opp omtrent 2 timer etter døden i ansiktsmuskulaturen, utvikler seg til lemmer de neste timene og fullfører mellom 6 og 8 timer etter døden.Rigor mortis forblir deretter i ytterligere 12 timer (til 24 timer etter døden) og begynner deretter å forsvinne. I den siste fasen av Rigor Mortis begynner aktin-myosinkomplekset som har dannet seg å oppløses på grunn av proteolyse, noe som resulterer i oppløsning av stivhet. Denne prosessen begynner i alle cellene samtidig, men akkurat som med utseendet, er denne endringen merkbar først i de mindre muskler i ansiktet, etterfulgt av muskler i overekstremiteter og til slutt de store musklene i underekstremiteter. Rigor mortis forsvinner vanligvis 36 timer etter døden, etterfulgt av en fase kjent som sekundær slapphet.

Livor Mortis

Den endelige endringen i den klassiske triaden er livor mortis, som er den purpurfargede -blå misfarging av huden i de avhengige kroppsdelene på grunn av blodinnsamling i hudkar forårsaket av tyngdekraft. Hypostase utvikler seg som flekker av misfarging innen en halv time til 2 timer, disse flekkene smelter sammen og danner større flekker, som videre kombineres for å danne en jevn misfarging av de avhengige kroppsdelene som ikke har vært utsatt for trykk, som vises fra 6 til 12 timer. Misfargingen blir ‘fikset’ etter en viss periode på grunn av oppløsningen av blodceller og utløpet av hemoglobin. Denne fiksasjonen bekreftes ved å bruke trykk med tommelen og brukes tradisjonelt til å betegne en PMI som er større enn 12 timer. Denne metoden for estimering av PMI krevde en objektiv og moderne tilnærming, som førte til utvikling av kolorimetriske metoder for estimering av PMI fra livor mortis.

Histo-morfologisk analyse

Andre metoder for estimering av TSD i tidlig fase inkluderer histo-morfologisk og biokjemisk analyse. Totalt og differensialt blodtall, så vel som den mikroskopiske morfologiske undersøkelsen av blod, er beskrevet som en metode for estimering av TSD. Alle blodceller var ikke identifiserbare lenger enn 84 timer etter døden. På samme måte ble antall blodceller også funnet å reduseres utover 84 timer etter døden. Histologiske studier av huden har vist at degenerative endringer dukker opp i huden 6 timer etter døden og først vises som vakuolering av corpus basale og spinosum. Dermo-epidermal separasjon ses 9 timer etter døden, mens dermis viste henholdsvis sjeldenhet og oppløsning 6 og 18 timer etter døden. Glykogenet i svettekjertlerens basale membran, sekretoriske celler, cytoplasma, samt kanalceller blir utarmet innen 3 timer PMI og fører til PAS-negative celler på histologi. Basalmembranen viser imidlertid en magenta flekker opptil 18 timer etter mortem. De ekskrine svettekjertlene viser vakuolering etter 3 til 4 timer PMI, og celler ser ut til å ha gått helt i oppløsning 15 timer etter døden. Talgkjertlene virker normale til 18 timer etter mortem, sett på som en separasjon av lagene og oppløsningen av hårpapillen. Studier har også vist at pleocytose kan brukes til å estimere PMI ved hjelp av en polynomligning av tredje orden. Cellene er primært lymfocytter med en signifikant brøkdel av makrofager, som blir vakuolert og ikke identifiserbar etter 12 timer.

Biokjemisk vurdering

Biokjemisk blodvurdering er ikke-signifikant i umiddelbar post mortem fase på grunn av mangel på cellulær død. På den annen side gjør celledød det vanskelig å vurdere biokjemisk blod i tidlig fase. Det er også omfordeling av elektrolytter fra cellene til plasma og serum, noe som resulterer i varierende endringer i nivåene av disse elektrolyttene. Disse variasjonene og deres implikasjoner er studert i det fremvoksende feltet thanato-chemistry. Den biokjemiske vurderingen har vært nyttig for å estimere PMI fra glasslegemet, synovialvæske, perikardialvæske, urin og cerebrospinalvæske. Det må imidlertid tas hensyn til en rekke faktorer når man undersøker PMI basert på biokjemi, inkludert, men ikke begrenset til, alder, kjønn, biologisk bakgrunn, livsstil, dødsårsak og en hel rekke andre indre og ytre faktorer. Bare noen få biokjemiske markører (av 388) ble funnet å ha hatt tilstrekkelig undersøkelse med disse betraktningene – nemlig kalium, natrium, urea samt klorid, magnesium, hypoksantin og kardiale troponin T. Det ble funnet at det ble vurdert være alarmerende, med 0 (null) biokjemiske markører som vurderes å ha hatt egnet forskning og egnet for bruk. Seks ble funnet å være forsket på passende måte, men ikke egnet for praktisk bruk. I mellomtiden ble 18 funnet å ha blitt undersøkt dårlig og ikke egnet for påføring, og ytterligere 364 biokjemiske markører hadde ikke tilstrekkelig informasjon.

Supra-vital reaksjoner

Supra-vital reaksjoner har også blitt foreslått som et middel til estimering av PMI. Bestemmelsen av overvitalitetsperioden kan derfor hjelpe til med å estimere PMI.For denne metoden definerer Madea PMI i fire trinn – latensperioden, der til tross for stopp av sirkulasjonen, utfører vevet fortsatt aerob respirasjon til uttømming av lagrene – overlevelsesperioden, der det er tap av vevsfunksjon, men de kan bli aktivert på nytt ved hjelp av eksterne stimuli, for eksempel elektrisk stimulering av nerver – gjenopplivningsperioden, der vevets evne til å komme seg helt er tapt, – og den overvitalale perioden. Madea definerer supra-vitalitet som overlevelsesperioden for vev etter fullstendig, irreversibel iskemi. Dette konseptet sier at overlevelsesperioden omfatter latensperioden, gjenopplivningsperioden omfatter både latensperioden og overlevelsesperioden og supra-vitalitetsperioden inkluderer alle de tre andre. Supra-vitalitet er også forskjellig fra gjenopplivningsperioden ved at vevet er eksitabelt uavhengig av funksjonsgjenoppretting. Som et eksempel er gjenopplivningsperioden for skjelettmuskulaturen tilnærmet 2 til 3 timer, men den overnaturlige perioden kan i noen tilfeller strekke seg til 20 timer. Tilsvarende har hjertemuskulaturen en gjenopplivningsperiode på 3,5 til 4 minutter, mens den overnevne perioden kan strekke seg opptil 2 timer. En metode for estimering av PMI ble utviklet ved hjelp av den elektriske spenningen i Orbicularis oculi ved bruk av overflateelektroder. Et forhold mellom avslapningstid og maksimal kraft, kalt kraftrelatert avslapningstid, ble funnet å være pålitelig for estimering av PMI. Det er også viktig å vurdere superfølsomheten til vev i den umiddelbare post mortem-fasen, kalt Zsakos fenomen. Den supra-vitale reaksjonen undersøker derfor den idio-muskulære eller lokale sammentrekningen og ikke sammentrekningen av hele muskelen.

Sen PMI

Den sene post mortem-fasen er perioden når kroppsvevet begynner å gå i oppløsning og kan primært beskrives som nedbrytning eller forråtnelse, dannelse av adipocere, mumifisering eller skjelettdannelse. Kompleks vev i kroppen begynner å gå i oppløsning til enklere molekylære former som et resultat av nedbrytningen av vevet av kroppens enzym eller bakterier, samt bakterier som koloniserer restene etter døden. Kroppen gjennomgår hovedsakelig nedbrytning eller forråtnelse, noe som resulterer i grønnaktig misfarging, oppblåsthet på grunn av gassdannelse og flytende nekrose. Nedbrytningen av restene er avhengig av klima, årstid, kroppsvekt og klær. Nedbrytning kan deles i fem trinn – fersk, tidlig nedbrytning, avansert nedbrytning, skjelettdannelse og ekstrem nedbrytning.

Ny fase

Den ferske fasen kan starte så tidlig som 24 timer og så sent som 7 dager etter døden, spesielt i kaldere vintermåneder. Denne fasen viser ingen insektaktivitet annet enn avsetning av blåseegg i hulrommene og områdene med vevsavføring. Eggavsetning er dokumentert hos levende pasienter, spesielt hos immobile og svekkede forsøkspersoner.

Tidlig nedbrytningsfase

Den tidlige nedbrytningsfasen begynner med utbruddet av hudglidning og hårtap. Disse endringene begynner vanligvis fra den første dagen etter døden til opptil fem dager etter mortem. Maggots begynner også å dukke opp på kroppen, fra den andre dagen etter mortem; kroppen ser grågrønn og marmorerende ut (noen deler av kroppen kan fremdeles virke rosa). Den rette iliac fossaen er den første kroppsdelen som viser grønnaktig misfarging og kan sees så tidlig som den andre dagen etter mortem. Dette skyldes den relativt overfladiske stillingen til blindtarmen. Ekstremitetene virker brune med tørking av huden, spesielt over fingrene, nesen og ørene, og begynner vanligvis den andre dagen etter mortem; kroppen virker grønnaktig med tydelig oppblåsthet. Den grønne misfargingen, som startet ved høyre iliac fossa, utvikler seg til å omfatte hele magen, med samtidig oppblåsthet i magen, som igjen kan starte på den andre dagen. Oppblåstheten går frem til resten av torsoen og deretter kroppen, noe som resulterer i krepitasjoner over hele kroppen ved håndtering. Denne fasen er også forbundet med rensing – frigjøring av nedbrytningsvæske fra åpningene – og en sterk ubehagelig lukt. Oppblåsthet kan sees så tidlig som tre dager etter døden og avtar vanligvis etter andre ukers post mortem på grunn av forstyrrelser i magegassene; Kroppen ser ut som svartgrønn i andre uke; og til slutt virker kroppen brunsvart med skinnet skinn. Dette stadiet sees vanligvis til slutten av den første måneden, men kan forlenges til så lenge som to måneder. Det underliggende vevet ser også mørkt ut med teksturen som endres til en tyktflytende, slimete pasta. Mellom den tiende dagen og slutten av den første måneden fortsetter maggot-aktiviteten under den læraktige huden, med huden ytterligere tørking for å danne et herdet læraktig skall, med tap av underliggende bløtvev.

Avansert nedbrytningsfase

Den avanserte nedbrytningsfasen begynner med utseendet på løs hengende hud og sammenbrudd i bukhulen. Kroppen viser også omfattende mageinfeksjoner. Disse endringene vises vanligvis på fjerde dag etter mortem, men kan begynne så sent som ti dager etter døden. Tap av bløtvev, inkludert tap av tørket skinnaktig hud, resulterer i eksponering av mindre enn halvparten av skjelettmaterialet. Denne fasen er vanligvis assosiert med tilstedeværelsen av puppetilfeller, så vel som formen over kroppen og klærne; dette skjer vanligvis i den andre måneden, men kan forekomme seks til ni måneder etter mortem. Tørking av den ytre huden kan følge den strukturelle retensjonen av indre organer, eller være ledsaget av autolyse og tap av indre organer. Nedbrytning kan utvikle seg raskt i nedgravde rester eller i rester som er igjen i et miljø med høy luftfuktighet, noe som resulterer i ekstrem magaktivitet, akselerert autolyse, og kan utvikle seg direkte til skjelettdannelse eller dannelse av adipocere, uten uttørking og mumifisering av hud og ytre vev. Restene kan gjennomgå enten forsåning eller uttørking, kalt henholdsvis formasjon av adipocere og mumifisering, avhengig av miljø og tilstedeværende forhold. Tilstedeværelsen av et varmt, fuktig miljø som mangler oksygen, favoriserer utviklingen av adipocere – et voksaktig stoff som skyldes anaerob bakteriell hydrolyse av kroppsfett. Den primære organismen som er ansvarlig for adipocere dannelse er Clostridium perfringens, forårsaker årsaker aggregering av krystall av fettsyre, noe som resulterer i tap av cellulær detalj samt tap av epidermis. Dannelsen av adipocere og varigheten avhenger primært av pH, temperatur, fuktighet og oksygenmangel i miljøet.

Skjelettiseringsfase

Skjelettiseringsfasen resulterer i eksponering av mer enn halvparten av skjelettelementene, som fremdeles kan demonstrere bløtvev som fremdeles er festet. Imidlertid er skeletonisering vanligvis assosiert med uttørket vev eller adipocere over mindre enn halvparten av kroppen. Det uttørkede vevet vises oftest ved muskel- eller ligamentfester langs ryggraden så vel som ender av lange bein. I mellomtiden blir adipocere ofte sett over lårene, med høye subkutane fettavleiringer. Dette stadiet vises to måneder etter døden, selv om det vanligvis presenteres mellom to og ni måneder etter mortem. Fortsettelse av spaltning fører til eksponering av alt osseøst materiale, med bare noe fettete materiale igjen eller utsetter tørre bein; dette ses vanligvis etter seks måneders eksponering, selv om det er rapportert å ha skjedd så tidlig som den tredje uken. Dette stadiet kan vare i mange år hvis elementene ikke blir eksponert, slik man ser det i nedgravde rester eller rester som er funnet innendørs.

Ekstrem nedbrytningsfase

Fasen med ekstrem nedbrytning sees bare i rester som har blitt utsatt for miljøet og fører til erosjon av skjelettelementene. Denne erosjonen begynner med prosessen med bleking av bein og blir ofte sett seks måneder etter eksponering, selv om det har blitt dokumentert å vises så tidlig som to måneder etter døden og så sent som to og et halvt år etter mortem. Skjelettelementene gjennomgår ytterligere degenerering av den kortikale strukturen, noe som resulterer i et metafysaltap i lange bein og eksponering av den kanselløse delen av svampete bein; dette ses ofte mellom et år til et og et halvt år etter døden, selv om det er rapportert å ha skjedd så tidlig som den fjerde måneden. Metafysetapet ble rapportert å ha oppstått ved PMI på fem og et halvt år.

Forensic Entomology

Rettsmedisinske entomologianalyser har vært en rutinemessig praksis for estimering av PMI tidlig og sene post mortem perioder. Det er to metoder for estimering ved bruk av rettsmedisinsk entomologi – basert på arv og basert på utvikling. I en suksessbasert tilnærming velges en passende arvemodell for bruk, en som tilsvarer miljøforholdene, inkludert dødsforholdene. Det er derfor behov for rettsmedisinsk forskning om effekten av miljøfaktorer på nedbrytning og insektsfølelse. Mañas-Jordá demonstrerte at forskjellige taxa ble funnet å være utbredt basert på miljøforhold. Artsmangfoldet, samt antall individer, ble undersøkt. De oppdaget ingen artsforbindelse med trinn I og II for nedbrytning, tre arter assosiert med trinn III, to arter assosiert trinn IV og en art assosiert med trinn V ved Huitepec naturreservat.I byen San Cristóbal de las Casas ble fire arter funnet å være assosiert med trinn II, tre arter ble funnet å være assosiert med trinn III, bare en art Chrysomyarufifacies (Macquart; Diptera: Calliphoridae) og Fannia sp1 assosiert med trinn IV og til slutt ble Stilpon sp1 funnet å være assosiert med trinn V.

Den utviklingsbaserte tilnærmingen ser på tilstedeværelsen av forskjellige stadier av insektet på kroppen så vel som i det omkringliggende området, for å hjelpe til med å estimere PMI. Matuszewski brukte L. caesar (Diptera: Calliphoridae), Thanatophilus sinuatus og N. littoralis (Coleoptera: Silphidae) i sin forskning for å demonstrere at tilstedeværelsen av et utviklingsstadium og fravær av de påfølgende utviklingsstadiene til carrion insekter, kunne brukes i sammen med estimeringen av deres pre-uterus intervall (PAI) for å utvikle en pålitelig estimering av PMI. Det er derfor viktig å etablere kjente PAI-verdier for forskjellige insekter i miljøet som undersøkes.

Molekylær vurdering

Nylige fremskritt innen molekylærbiologi har ført til forskjellige fremskritt i estimeringen av PMI. Degenerasjonen av mRNA, DNA og proteiner blir evaluert og kan brukes til å estimere PMI. RNA-transkripsjoner ble funnet å være de mest relevante på grunn av deres raske degenerasjon og tidsmessige korrelasjon. Flere studier demonstrerte en lineær korrelasjon mellom PMI og degenerasjon. Denne sammenhengen ble funnet å være temperatur- og vevsavhengig.

En studie fra Porto, Portugal undersøkte 11 gentranskripsjoner for korrelasjon med TSD. 8 murine vev ble delt inn i tre grupper basert på stabiliteten til RNA – første gruppe (I) bestående av vevsprøver fra hjerte, milt og lunge, andre gruppe (II) besto av femoral quadriceps, lever og mage og den tredje gruppen (III) Bukspyttkjertel og hud. Prøver fra gruppe I og II ble analysert i serie. Analysen viste at RNA-degenerasjon var tidsavhengig i hele 11 timer, selv om det ikke var påviselig statistisk signifikans de første fire timene. Forskere valgte 11 gener for kvantitativ PCR-analyse. Mens RNA i hjertet ble funnet å være mest stabilt, viste det ingen korrelasjon med PMI. Totalt seks gener ble funnet å korrelere med PMI, fire i femorale quadriceps (Actb, Gapdh, Ppia og Srp72) og to gener i leveren (Alb og Cyp2E1). Matematiske modeller ble utviklet for å estimere PMI med et feilmiddel på 51,4 minutter.